重组DNA技术的基本工具高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

3.1重组DNA技术的基本工具道县一中陈文玥人教版（2019）高中生物选择性必修32025年“湘道杯”大赛

考向解读课标要求1.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。2.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤。考情分析基因工程的原理及技术2024山东T13，2024湖南T21，2024广东T21，2023全国新课标T6，2023山东T25，2022山东T25，2022广东T22，2021全国乙T38，2021全国甲T38考查方式本部分的命题，以非选择题为主，属于高考必考内容，题目内容多，难度往往较大。试题情境新颖，大多来自大学教材和必威体育精装版的论文文献，核心素养侧重对科学思维和科学探究的考查。

从社会中来

大肠杆菌转基因大肠杆菌人胰岛素基因导入胰岛素提取(外源基因)(受体细胞)问题探讨1.能否直接将胰岛素基因送入大肠杆菌细胞？2.怎样才能将胰岛素基因送入大肠杆菌细胞呢？糖尿病患者需要注射胰岛素，从生物体中提取胰岛素成本高、产量低。而制备相应工程菌能够更经济有效地解决这个问题。怎么把胰岛素基因导入大肠杆菌呢？

重组DNA技术的基本工具2、怎样才能将胰岛素基因送入大肠杆菌细胞呢？1、能否直接将游离的胰岛素基因送入大肠杆菌细胞？游离的DNA片段进入受体细胞，一般会直接被分解，就算可以进行转录并翻译成蛋白质，游离的DNA片段也无法随着细胞分裂而进行复制，导致子代细胞中不再含有目的基因。通常是利用质粒作为载体，将基因送入细胞。胰岛素基因5’3’3’5’拟核DNA质粒细菌结构示意图

1分子运输车——载体重组DNA技术的基本工具外源基因质粒、噬菌体和动植物病毒种类用途不同点质粒、噬菌体植物病毒动物病毒将外源基因导入各种受体细胞将外源基因导入植物细胞将外源基因导入动物细胞它们来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小也有很大差别动物病毒噬菌体将送入，在受体细胞内对目的基因进行。在基因工程中使用的载体包括等。1.作用：2.种类：受体细胞大量复制总结

资料1：科学家发现，炭疽热的真凶是炭疽杆菌中的一种毒性物质，可以感染宿主细胞，引发动物或人生病。美国生物学家乔治·莱德伯格于1952年将其命名为“质粒”，并发现其在细菌基因重组中的功能，莱德伯格因此斩获了1958年的诺贝尔生理学和医学奖。资料分析质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。质粒思考1：载体需要有哪些优点？可插入、可转移、能复制、能找到

资料2：资料分析天然质粒＞15kbPET-20b(+)3.7kb复制原点可插入标记基因真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。如右图所示的PET-20b

资料3：研究发现噬菌体可以侵染细菌，科学家利用同位素标记的噬菌体侵染流感嗜血杆菌，结果出乎意料在实验步骤没有差错的情况下，没有在细菌中检测到放射性。后来，有科学家发现细菌中有一种酶可以通过切断病毒的DNA来限制病毒增殖，这种酶被称为限制性内切核酸酶。资料分析如何对质粒进行改造？如何插入胰岛素基因？资料4：EcoRⅠ是一种限制性内切核酸酶，来自大肠杆菌(E.coli)的R型菌株，能专一识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。3′3′5′5′回文序列体现出限制酶的什么特性？酶的专一性

学生活动一根据所提供的质粒识别序列，请你自由选择合适的限制酶（剪刀）将质粒剪出缺口。注：EcoRⅠ(G↓AATTC)、BamHⅠ(G↓GATCC)、SmaⅠ(CCC↓GGG)、BclⅠ(T↓GATCA)、

学生活动一课堂实况点评：以EcoRⅠ(G↓AATTC)为例，出现以下两种切法，请判断正误并说明理由根据所提供的质粒识别序列，请你自由选择合适的限制酶（剪刀）将质粒剪出缺口。错误原因：下面那条链没有按照EcoRⅠ的识别位点进行切割

2分子手术刀——限制性内切核酸酶（限制酶）重组DNA技术的基本工具①实例1——EcoRⅠ限制酶切割*EcoRⅠ识别序列为GAATTC*EcoRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键黏性末端黏性末端②实例2——SmaⅠ限制酶切割*SmaⅠ识别序列为CCCGGG*SmaⅠ切割部位为CG之间的磷酸二酯键平末端总结

学生活动二选择合适的限制