鸡传染性支气管炎免疫增强型核酸疫苗：构建策略与免疫保护机制的深度剖析.docxVIP

鸡传染性支气管炎免疫增强型核酸疫苗：构建策略与免疫保护机制的深度剖析

一、引言

1.1研究背景与意义

鸡传染性支气管炎（InfectiousBronchitis，IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（InfectiousBronchitisVirus，IBV）引起的一种急性、高度接触性传染病，在全球养鸡业中广泛传播。该病主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道和消化道等，导致鸡群出现呼吸道症状、产蛋量下降、肾脏病变以及生长发育受阻等问题，给养鸡业带来了巨大的经济损失。

IBV具有高度的变异性，其基因组为单股正链RNA，由于缺乏RNA校对酶，在病毒复制过程中容易发生基因突变，从而产生众多的血清型和基因型。据报道，目前已发现的IBV血清型超过40种，不同血清型之间的抗原性差异较大，交叉保护作用较弱。这使得传统疫苗在防控IB时面临很大的挑战，难以对所有的变异毒株提供有效的保护。例如，经典的H120和H52弱毒疫苗对一些新出现的变异株的免疫效果明显下降，导致免疫鸡群仍然会感染发病。此外，IBV还容易与其他病原体如新城疫病毒、大肠杆菌等发生混合感染，进一步加重病情，增加了防控的难度。

免疫增强型核酸疫苗作为一种新型疫苗，具有独特的优势。它能够同时激活机体的体液免疫和细胞免疫，产生持久的免疫应答。与传统疫苗相比，核酸疫苗的制备过程相对简单，成本较低，且可以快速针对新出现的病毒变异株进行调整和优化。通过将免疫增强元件与编码IBV保护性抗原的基因相结合，能够显著提高疫苗的免疫效果，增强机体对IBV的抵抗力。例如，在核酸疫苗中添加免疫刺激序列（ISS）、细胞因子基因等，可以增强抗原提呈细胞的活性，促进T细胞和B细胞的活化和增殖，从而提高疫苗的免疫原性。

研究免疫增强型核酸疫苗的免疫保护机理，有助于深入了解机体对IBV的免疫应答机制，为疫苗的优化和改进提供理论依据。通过探究核酸疫苗在体内的摄取、表达、抗原提呈以及免疫细胞的活化等过程，可以揭示免疫增强型核酸疫苗发挥免疫保护作用的关键环节和分子机制。这不仅能够为鸡传染性支气管炎的防控提供更加有效的手段，还可以为其他畜禽传染病的疫苗研发提供借鉴和参考，推动整个动物疫苗领域的发展。因此，开展鸡传染性支气管炎免疫增强型核酸疫苗的构建与免疫保护机理的研究具有重要的理论和实践意义，对于保障养鸡业的健康发展、提高养殖经济效益以及维护公共卫生安全都具有不可忽视的作用。

1.2国内外研究现状

国内外对鸡传染性支气管炎疫苗的研究一直是家禽疫病防控领域的重点。传统疫苗在IB的防控中曾发挥重要作用，其中弱毒疫苗以荷兰株H52和H120应用最为广泛。H52和H120弱毒疫苗能有效刺激机体的体液与细胞免疫，方便生产且成本低，对经典的呼吸型IBV感染有一定的免疫保护作用，可使鸡群在一定程度上抵抗病毒的侵袭，减少发病率。但它们对肾型传染性支气管炎的预防无效，且存在能在感染机体中引起持续的潜伏感染、毒力返强以及无法应对病毒变异等问题。中国兽药监察所研制的肾型IBW93疫苗，对肾型传染性支气管炎有良好效果，对呼吸型和变异性传染性支气管炎也有一定预防效果，但同样面临病毒变异带来的挑战。灭活疫苗安全性好，不存在散播病原和毒力返强的问题，能激发良好的体液免疫反应。然而，由于IB血清型的多样性，油乳剂等灭活苗无法阻止IBV变异株引起的IB的爆发。虽有研究指出多价灭活疫苗更为有效，但灭活疫苗副作用大，免疫后会造成较严重且持续时间较长的局部反应，对冠状病毒感染的免疫效果也不确实。

随着分子生物学技术的发展，基因工程疫苗成为研究热点。亚单位疫苗具有高效、广谱、无毒和特异性强等优点，常用的表达系统包括大肠杆菌系统、酵母菌表达系统、昆虫细胞和植物表达系统。研究表明，重组杆状病毒表达的S1蛋白单独免疫鸡的保护率可达50%，用异源弱毒疫苗株H120初免再用重组杆状病毒S1糖蛋白加强免疫，保护率可达到83%。国内研究也证实，在昆虫细胞中表达的IBVS1基因，即使N-糖基化不完全，仍有良好的免疫原性。植物表达系统表达的S1亚单位疫苗经多次反复免疫，可形成有效的免疫保护。如将IBVS1基因片段导入玉米表达载体进行表达，以及利用根瘤菌将IBV全长S基因转入马铃薯中表达，免疫仔鸡后能产生中和抗体，激发体液免疫和细胞免疫。

免疫增强型核酸疫苗作为新型疫苗的一种，近年来受到关注。核酸疫苗是由编码能引起保护性免疫反应的病原体抗原的基因片段和载体构建而成。在鸡传染性支气管炎免疫增强型核酸疫苗的研究中，有学者应用筛选出的鸡传染性支气管炎病毒结构蛋白S1基因的T细胞抗原表位盒、AustraliaT株和M41株S1基因的B