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2025/07/14

单向扩散试验平板法

汇报人：_1751850234

CONTENTS

目录

01

实验原理

02

实验材料与设备

03

实验操作步骤

04

结果分析

05

实验注意事项

06

应用领域

实验原理

01

抗菌素作用机制

抑制细胞壁合成

例如青霉素通过干扰细菌细胞壁的合成，导致细胞破裂死亡。

破坏细胞膜完整性

多粘菌素等抗菌素通过破坏细菌细胞膜的完整性，引起细胞内容物泄漏。

抑制蛋白质合成

四环素类和氨基糖苷类抗菌素通过抑制细菌的核糖体功能，阻止蛋白质合成。

干扰核酸合成

氟喹诺酮类抗菌素通过抑制DNA回旋酶，干扰细菌DNA的复制和转录过程。

抑菌圈形成原理

抗生素扩散机制

抗生素在培养基中扩散，与细菌接触后抑制其生长，形成清晰的抑菌圈。

细菌生长抑制

细菌在抗生素作用下无法繁殖，导致其生长区域出现透明的抑菌圈，反映药物效力。

实验材料与设备

02

实验所需材料

培养基

准备适合目标微生物生长的固体培养基，如营养琼脂平板。

无菌水

使用无菌水溶解样品，保证实验过程中的无菌条件。

移液管和吸头

用于精确转移培养基和样品，确保实验的准确性。

无菌拭子或接种环

用于采集样品并接种到培养基上，进行微生物的分离和培养。

实验所需设备

恒温培养箱

用于提供稳定的温度环境，确保微生物在适宜条件下生长繁殖。

无菌操作台

提供无菌环境，用于准备培养基和接种微生物，防止污染。

显微镜

用于观察微生物形态特征，帮助识别和计数平板上的菌落。

实验操作步骤

03

样品制备

选择合适的培养基

根据目标微生物选择适宜的培养基，如营养琼脂或血琼脂，以促进微生物生长。

样品稀释

将采集的样品进行适当稀释，以获得适合计数的微生物浓度，避免平板上菌落重叠。

平板制备

恒温培养箱

用于提供稳定的温度环境，保证微生物在适宜条件下生长。

无菌操作台

提供无菌环境，用于准备培养基和接种微生物，防止污染。

显微镜

用于观察微生物形态和数量，帮助分析实验结果。

抗菌素纸片放置

抗生素扩散

抗生素在培养基中扩散，抑制细菌生长，形成清晰的抑菌圈。

细菌生长抑制

细菌在抗生素作用下无法繁殖，导致平板上相应区域无菌落生长。

培养与观察

选择合适的培养基

根据目标微生物选择适宜的培养基，如营养琼脂用于一般细菌培养。

样品稀释

将采集的样品进行适当稀释，以获得适合计数的微生物浓度。

结果分析

04

抑菌圈测量

培养基

准备适合目标微生物生长的固体培养基，如营养琼脂平板。

无菌水

使用无菌水溶解样品，保证实验结果的准确性。

移液管和吸头

用于精确转移培养基和样品，确保实验过程无污染。

无菌拭子

用于采集样品，如鼻拭子或咽拭子，用于微生物的分离和培养。

敏感性判定标准

抑制细胞壁合成

例如青霉素通过干扰细菌细胞壁的合成，导致细胞破裂死亡。

破坏细胞膜完整性

如多粘菌素作用于细菌细胞膜，导致细胞内容物泄漏，进而杀死细菌。

抑制蛋白质合成

四环素类和氨基糖苷类抗生素通过结合到细菌的核糖体，阻止蛋白质的合成。

干扰核酸合成

氟喹诺酮类药物通过抑制DNA回旋酶，阻止DNA复制，从而抑制细菌生长。

实验注意事项

05

实验操作细节

采集样品

根据实验需求，从环境中采集水样或土壤样，确保样品具有代表性。

样品稀释

将采集的样品进行适当稀释，以便在平板上形成可计数的菌落。

常见问题及解决方法

恒温培养箱

用于提供稳定的温度环境，保证微生物的生长和繁殖。

无菌操作台

在实验中用于创建无菌环境，防止外界微生物污染实验样本。

显微镜

用于观察和鉴定培养出的微生物菌落，分析其形态特征。

应用领域

06

临床微生物学

抗生素扩散

抗生素在培养基中扩散，抑制或杀死细菌，形成清晰的抑菌圈。

细菌生长抑制

细菌在抗生素作用下无法生长，导致平板上相应区域无菌落形成。

抗菌素研发与筛选

恒温培养箱

用于提供适宜的温度条件，保证微生物在平板上正常生长和扩散。

无菌操作台

在实验过程中提供无菌环境，防止外界微生物污染实验样本。

高压蒸汽灭菌器

用于灭菌实验器材和培养基，确保实验结果的准确性。

THEEND

谢谢