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4.9选择性变性沉淀法;选择性变性沉淀法是使杂质变性沉淀,又对目的物没有明显影响,所以在操作之前要对欲分离的物质中的杂蛋白等杂质的种类、含量及其物理化学性质等有比较全面的了解。
例如对于α-淀粉酶等热稳定性好的酶,可以通过加热进行热处理,使大多数杂蛋白受热变性沉淀而被除去。;选择性分离核酸;;从氨基酸混合液中(如蛋白质水解液)提取某种特指氨基酸时,除采用等电点沉淀,柱层析等方法外还可使用一些特殊的沉淀剂。
如从猪血纤维水解液中制取组氨酸时,用氯化汞使其形成汞盐析出。沉淀洗净后制成悬液,再向沉淀中通入H2S气体即可使组氨酸重新游离。
从酵母酸性提取液中分离谷胱甘肽时,先使其生成亚铜盐沉淀,然后以H2S解析,再用丙酮将谷胱甘肽沉淀析出。
;;分离粘多糖的沉淀剂
乙醇
十六烷基三甲基季胺溴化物(简称为CTAB),
十六烷基氯化吡啶;季胺基上的阳离子与粘多糖分子上的阴离子可以形成季胺络合物。此络合物在低离子强度的水溶液中不溶解,但当溶液离子强度增加至一定范围,络合物则逐渐解离,最后溶解。
除了离子强度的影响外,CTAB对各种粘多糖的分级沉淀效果与各种粘多糖硫酸化程度和溶液pH值有关。
CTAB的沉淀效力极强,能从很稀的溶液中(如万分之一浓度)通过选择性沉淀回收粘多糖。
;各种沉淀方法应用范围
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