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[S]对v的影响米氏方程及米氏常数多底物的酶促反应pH和T对V的影响酶的激活剂和抑制剂2、酶促反应动力学生物化学EnzymeV-[S]的三阶段特征:双曲线一级反应混合级反应零级反应对V-[S]双曲线的解释:中间复合物学说:E先与S形成络合物ES(稳定的过渡态),再分解成产物和游离酶。前提:快速平衡学说2.1底物浓度的影响生物化学Enzyme催化反应特有的双曲线饱和段理论基础一:MichailisMenten“中间复合物”学说,核心“快速平衡法”酶促反应的历程:S相对于E过量时S与E迅速建立平衡,生成中间复合物ESES分解成游离酶E和产物P,分解成S反应忽略不计E+S===ES---E+PKs,表ES解离常数(底物常数)Ksk2.2米氏方程及米氏常数生物化学EnzymeV=Vmax[S]Ks+[S]理论基础二:BriggsHaldane“稳态”学说,核心“以稳态代替平衡态”稳态:反应体系中ES的生成速率和分解速率相等的状态,强调动态平衡。更准确。酶催化反应历程:S相对于E过量时S与E迅速建立平衡,生成中间复合物ESES分解成游离酶E和产物PE+S===ES===E+PKm,表米氏常数k1k3生物化学EnzymeV=Vmax[S]Km+[S]k2k4不同的酶具有不同Km值,是酶的一个特征物理常数,与酶的浓度无关。Km值只是在固定的底物,一定的温度和pH条件下,一定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的Km值。Km(或1/Km)值表示酶与底物之间的亲和程度。Km与米氏方程的应用:可判断酶的专一性和天然底物;由Km、[S]、V互相计算。可以帮助判断代谢反应的方向和途径附1:米氏常数的意义生物化学Enzyme附2:米氏常数的求法-L&B双倒数作图法斜率=Km/Vmax-1/Km1/Vmax1Km11??=?????+??VVmax[S]Vmax生物化学Enzyme准确性差-4-202468100.00.20.40.60.81.0V/[S]v附3:米氏常数的求法-E&H作图法斜率=-KmVmaxV=-km.V/[S]+Vm生物化学Enzyme生物化学Enzyme
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