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体外研究;Balb/c小鼠8周龄
动科部购置240只
分为40组,每组6只
;技术路线;;试验措施;;每孔细胞离心后重悬于2mlPBS,取100ul悬液分入2个EP管内,每管50ul(细胞数约1×106个),每管加PBS至100ul,加入CD3、CD4、Tim-3三种荧光抗体→离心→重悬于300ulPBS中→送检流式
细胞保存:细胞入1ml70%酒精4℃保存,第二天再行流式检测
;材料及试剂;Balb/c小鼠
淋巴细胞提取液、1640培养液、胎牛血清、IL-2、ConA
Galectin-9
PE-抗鼠Tim-3及同型对照
FITC-抗鼠CD3
PerCP-抗鼠CD4;体外试验小鼠不需要清洁级?
小鼠越重越好,可多提淋巴细胞?不需要区别雌雄,可将全部细胞混在一起再平均分配?
细胞同步做WB和FC,会不够吗?
细胞保存措施可行吗?
抗体是以上四种吗?怎样设门?
;
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