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细菌内毒素检测方法和操作规范

目录

一、文档概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1背景介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2目的意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

二、细菌内毒素概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1定义及性质．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.2分类与来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

三、细菌内毒素检测的目的和意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

3.1检测目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.2对临床诊断的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

四、细菌内毒素检测方法分类．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

4.1定性检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

4.2定量检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

五、定性检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

5.1常用定性检测技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

5.1.1酶联免疫吸附试验(ELISA)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

5.1.2聚合酶链反应(PCR)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

5.1.3荧光偏振免疫测定(FPIA)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

5.2操作步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

5.2.1样品处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

5.2.2实验条件控制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

5.2.3结果判定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

六、定量检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

6.1常用定量检测技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

6.1.1酶联免疫吸附试验(ELISA)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

6.1.2聚合酶链反应(PCR)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

6.1.3荧光偏振免疫测定(FPIA)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

6.2操作步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

6.2.1样品处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

6.2.2实验条件控制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

6.2.3结果计算与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

七、实验操作规范．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

7.1试剂准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

7.1.1试剂种类及选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

7.1.2试剂储存与使用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

7.2实验操作流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

7.2.1样品处理流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

7.2.2仪器设备操作指南．．．．．．．．．．．