仪器分析技术凌悦菲27课件.pptx

凌悦菲;Contents;;子任务1：了解紫外-可见分光光度法;波长范围：100~800nm。

远紫外区：100~200nm；

近紫外区：200~400nm；

可见光区：400~800nm。;紫外-可见分光光度法特点

（1）灵敏度高，检出限较低

（2）电子光谱图较简单，分析速度较快

（3）应用范围广;1.光的性质

光是一种电磁波，按照波长排列，可得到电磁波谱图。;光具有波粒二象性：一定波长的光具有一定的能量，波长越长（频率越低），光量子的能量越低

单色光：具有相同能量（相同波长）的光。

复合光：不同能量的光的组合。

互补光：两种不同颜色的单色光按照一定的强度比例混合得到白光，这两种单色光为互补光，这种现象称为光的互补。

;子任务1：了解紫外-可见分光光度法;2.物质颜色的产生

当一束白光照射某一有色溶液时，一些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过，溶液的颜色由投射光的波长所决定。吸收光与投射光互为补色光。

硫酸铜吸收白光中的黄光而呈现蓝色；高锰酸钾溶液吸收绿色的光而呈紫红色。;二、吸收定律;（1）摩尔吸光系数ε

A=εbc

物理意义：浓度为1mol/L的溶液，于厚度为1cm的吸收池中，在一定波长下测得的吸光度。

特点：

不随浓度和液层厚度的改变而改变；

同一吸收物质在不同波长下的ε值不同；

εmax越大，表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。;（2）质量吸光系数ρ

质量吸光系数适用于摩尔质量未知的化合物。溶液浓度以质量浓度ρ（g/L）表示，液层厚度以cm表示，则相应的吸光度为质量吸光度，质量吸光度以a（L/g·cm）表示。

A=abρ;子任务1：了解紫外-可见分光光度法;子任务1：了解紫外-可见分光光度法;（1）物理性因素

由仪器的非理想状态引起。

（2）化学性因素

溶液中的吸光物质因离解、缔合，形成新的化合物而改变了吸光物质的浓度。

（3）吸收定律的局限性

吸收定律是一个有限定律，只适用于浓度小于0.01mol/L的稀溶液。

;子任务1：了解紫外-可见分光光度法;子任务2：认识紫外-可见分光光度计;子任务2：认识紫外-可见分光光度计;光源;2.单色器;3.样品室;二、分光光度计的类型;子任务2：认识紫外-可???分光光度计;1.波长的校正

（1）仪器波长一般性检查

开启仪器，在吸收池位置插入一块白色硬纸片，将波长从720nm向420nm方向调节，观察出口狭缝射出的光线颜色是否与波长调节器所指示的波长相符。

（2）使用镨钕滤光片检查仪器波长

把镨钕滤光片放入比色皿架内，将波长调节到520nm，在空白挡上调节T=100%，然后拉动拉杆使镨钕滤光片进入光路测定透过率。在520～540nm间每隔2nm测定一次透过率，找出最小透过率对应的波长。

合格的分光光度计要求测出的峰的最大吸收波长与仪器标示值相差在±3nm以内。

;2.吸收池配套检验

在一组吸收池中加入已配好的30μg/mL重铬酸钾溶液，调节波长440nm，选择其中透过率最大的吸收为参比，调节其透过率T=100%，测定并记录其他比色皿的透过率值，要求透过率的最大值与最小值之差不大于0.5%。;子任务3：学习可见光分光光度计及紫外-可见分光光度计的使用;总结;