DB45_T2205-2020_甘蔗及其制品中葡聚糖的测定方法免疫比浊法_广西壮族自治区 conv.docxVIP

ICS67.180

CCSX30 DB45广西壮族自治区地方标准

DB45/T

甘蔗及其制品中葡聚糖的测定方法比浊法

2205—2020

免疫

DB45/T2205—2020

前

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则

定起草。

言

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

本文件由广西壮族自治区糖业发展办公室提出并宣贯。本文件由广西糖业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：广西糖业集团有限公司、广东省生物工程研究所（广州甘蔗糖业研究所）、广西

壮族自治区分析测试研究中心、广西壮族自治区产品质量检验研究院、广西糖业集团防城精制糖有限公司。

本文件主要起草人：柳颖、林荣珍、常国炜、马步、邓卫利、杨宇格、刘桂云、缪路、黎志德、张九花、杨华、林金梅、方海香、梁达奉。

DB45/T2205—2020

甘蔗及其制品中葡聚糖的测定方法 免疫比浊法

1 范围

本文件规定了甘蔗及其制品中葡聚糖含量免疫比浊法的测定。本文件适用于广西境内甘蔗及其制品中葡聚糖含量为3.5mg/L～600mg/L的测定。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682

GB/T9289

分析实验室用水规格和试验方法

制糖工业术语

3 术语和定义

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5.6 葡聚糖标准储备液（1mg/mL）：称取葡聚糖标准品2g（准确至0.1mg）于已恒重的称量瓶内，放于干燥箱内在105℃下干燥3h，取出，放在干燥器内，冷却至室温，称量（准确至0.1mg），计算葡聚糖标准品中的水分含量。根据葡聚糖标准品的水分含量，迅速称取未经干燥的葡聚糖，使其含无水葡聚糖约0.1000g，加入2.0mL水溶解成糊状，放置约10min，不时搅拌，使粒子均匀水化，当有凝胶物存在时，多次加入少量水至约25mL将凝胶状物溶解，移入100mL容量瓶，定容。此溶液现配现用。5.7 葡聚糖标准系列溶液：分别吸取葡聚糖标准储备液（1mg/mL）0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL于10mL容量瓶，再分别吸取蔗糖储备液（250g/L）6mL于上述6个10mL容量瓶中，定容。此葡聚糖标准系列溶液的质量浓度分别为0mg/L、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L和100mg/L。可根据样品中葡聚糖的实际含量配制相应质量浓度的葡聚糖标准系列溶液，质量浓度不超过600mg/L。5.8 葡聚糖单克隆抗体溶液：称取0.060g葡聚糖单克隆抗体（鼠抗葡聚糖IgM，效价大于106），溶于15mL缓冲溶液中，静置30min，移入带盖棕色小瓶，盖好，备用。该溶液应现配现用，在4℃下贮存期为7d。

6 仪器和设备

6.1 浊度仪：配1cm四面透光测试皿；入射光波长λ：(860±30)nm（LED光源）或400nm～600nm（钨灯），检测器处在与入射光垂直的位置上。

6.2 分析天平：感量为0.1mg。

6.3 干燥箱：控温范围室温为+5℃至250℃，温度分辨率为0.1℃。6.4 移液器：量程为20μL。

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皿盖子，上下颠倒6次混匀，混匀过程中应避免产生气泡。取下测试皿盖子，将测试皿放入浊度仪，盖上浊度仪盖子，放置1min后立即测定浊度值（N样），应在2min内测定完毕，按8.1.2计算反应体系浊度增量（△NTU样），与标准系列比较定量，得到试样中葡聚糖浓度（c）。

8 计算及结果表示

8.1 浊度增量

8.1.1 标准品测定

反应溶液体系的浊度增量按式（1）计算：

??标标标....................................................................（1）

式中：

??标——测定标准品时反应溶液体系的浊度增量，单位为散射浊度单位（NTU）；

标——测定标准品时反应后体系浊度，单位为散射浊度单位（NTU）；

标——测定标准品时反应前体系浊度，单位为散射浊度单位（NTU）。计算结果表示到小数点后一位。

8.1.2 试样测定

反应溶液体系的浊度增量按式（2）计算：

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9 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算数平均值的15％。

10 其他

对初压