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畜禽血常规检验（一）临床兽医学教研室内诊组2012年4月

内容实验目的与要求1血样的采取与抗凝2血细胞计数检查3

目的与要求掌握动物血样的采取与抗凝方法。掌握血红蛋白测定、红细胞及白细胞计数的操作方法与注意事项。

1、血样的采取①采血前的准备：采血用应事先消毒灭菌、干燥处理。采血部位应剪毛按常规消毒。②少量用血，一般可在耳尖、冠顶及静脉末梢等处进行采取。③多量用血，大动物可在颈静脉处进行采取；猪可在前腔静脉处采取；禽类在翅内静脉处采取，必要时可进行心脏穿刺采取。小动物一般采用心脏采血。

采血部位畜种采血部位畜种颈静脉马、牛、羊耳静脉猪、羊、犬、猫、实验动物前腔静脉猪翼下肱静脉家禽隐静脉犬、猫、羊蹼间静脉鸭、鹅前肢头静脉犬、猫、猪冠或肉髯鸡心脏兔、家禽、豚鼠断尾猪、实验动物

2、血样的抗凝兽医临床常用的抗凝剂、使用方法及用图，见下表。抗凝剂抗凝机制常用浓度使用方法用途肝素阻止凝血酶元转化为凝血酶而阻止血凝0.5～1%溶液配制后应及时使用，每10ml血液加入0.1～0.2ml。适用于多数血液实验诊断检验，不宜用于血涂片检查。柠檬酸钠（枸橼酸钠）与钙离子形成非离子的可溶性化合物而阻止血凝3.8%溶液每10ml血液加入1ml。适用于红细胞沉降率、输血用抗凝，但不宜用于血液生化指标测定。EDTA-Na2螯合血中钙离子而阻止血凝10%溶液每10ml血液加入0.1～0.2ml。适用与一般血液学检查，不宜用于钠、钙的测定。草酸盐合剂（草酸铵＋草酸钾）与钙离子结合，形成不溶解的草酸钙而阻止血凝1～2%的草酸盐溶液取此液先作抗凝瓶。1ml此液可抗凝10ml血样（制作抗凝瓶应小于80℃）。有毒不能用于输血的抗凝，不宜用于白细胞分类计数与血小板计数。肝素

检查项目保存时间（h）检查项目保存时间（h）白细胞计数2～3血红蛋白含量48红细胞计数24红细胞压积容量24血小板计数1红细胞沉降速率2～3网织红细胞计数2～3白细胞分类计数1～2

1、原理血液经200倍稀释后，充入血细胞计数板，用显微镜观察，计数一定容积内的红细胞数并换算成每升血液中的红细胞数。2、器材与试剂改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、0.85%氯化钠稀释液。

方法No.3用5毫升吸管准确吸稀释液2毫升于试管中，用沙利氏吸管吸取血样10微升，用脱脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入试管底部，轻轻压出血液于稀释液中，再用上清液吸、吹数次，以洗出沙利氏管内黏附的血细胞，充分混匀后备用。将稀释后的血样用小玻棒取一滴，置于计数板与盖玻片交界的边缘，让其自然浸入，使稀释血样扩散入计数室内，静置2～3分钟，镜检。计数时用低倍镜，依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格，共80个小方格的红细胞数。为避免重复和遗漏，计数时应按一定顺序进行。注意压在双线上的红细胞，遵守“数左不数右，数上不数下”计数法则。No.2No.1

计算方法01每mm3血液内红细胞总数02=5个中方格内红细胞数×5×10×200×10603=5个中方格内红细胞数×101004单位：个/升05式中×5—5个中方格换算成1个大方格06×10—1个大方格容积为0.1微升，换算成1.0微升07×200—血液的稀释倍数08×106—由微升换算成升09注意防凝、防溶、取样正确。

健康动物除山羊的红细胞数较多外，其他动物的红细胞数约为6.0×1012～8.0×1012/L。相对增多：脱水、急性胃肠炎、肠便秘、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎、某些传染病；绝对增多：红细胞增多症，见于代偿性机能不全的心脏病及慢性肺部疾病；减少：各种贫血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性贫血、营养不良性贫血、继发性贫血。正常参考值临床意义

1、原理：用白细胞稀释液破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在显微镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。2、试剂与设备：改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、白细胞稀释液（2%冰醋酸溶液或1%盐酸溶液）。

方法：用1毫升移液管吸取白细胞稀释液0.4毫升于小试管中，再用沙利氏吸管吸取血样至20微升处，用脱脂棉擦去吸管周围多余血液，然后将吸管插入小试管底部，缓慢放出血液后用上清液反复吹洗数次，以洗净管内所粘附的血液，充分混匀振荡，备用。取样与计数方法与红细胞计数方法相同，计数在计数室四角的四个大方格内的白细胞数。

每升血液内白细胞总数=四个大方格白细胞数÷4×10×20×106单位：个/升4、计算方法：初学者容易把尘埃异物与白细胞混淆，可用高倍镜观察，白细胞有细胞核的结构，而尘埃异物的形状不规则，无细胞结构。