FMDV抗原表位多肽及分子佐剂对小鼠上呼吸道免疫影响的探究.docxVIP

FMDV抗原表位多肽及分子佐剂对小鼠上呼吸道免疫影响的探究

一、引言

1.1研究背景

口蹄疫（Foot-and-MouthDisease，FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-MouthDiseaseVirus，FMDV）引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，主要感染猪、牛、羊和骆驼等偶蹄动物。FMDV传播速度极快，易感动物众多，在亚洲、非洲、中东以及南美等地区广泛流行，给畜牧业带来了沉重打击，严重制约了相关畜产品的对外贸易。世界动物卫生组织将其列为A类传染病之首，我国也将其列入动物一类传染病。

FMDV属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属，是RNA病毒中最小的成员之一。其病毒粒子呈球形，直径为20-25nm，无囊膜。病毒的核心是一条单链的正链RNA，约由8500个核苷酸组成，这是病毒感染和遗传的关键；周围包裹的蛋白质则决定了病毒的抗原性、免疫性和血清学反应能力。目前，根据血清学特性，FMDV可分为7个血清型，分别为A型、O型、C型、南非1型、南非2型、南非3型和亚洲1型，各血清型之间无交叉免疫保护，且同一血清型的不同分离毒株抗原性也存在差异，交叉保护性差，这无疑大大增加了防控难度，使得防控口蹄疫相当于防控7种不同的传染病，需要分别研制针对性的疫苗。例如，2022年3月南非西北省一家农场发生口蹄疫（南非2型），涉及1600头牛，其中1100头牛发病，此次疫情对当地畜牧业造成了巨大冲击。

在自然条件下，FMDV对外界环境的抵抗力较强，含毒组织及污染的饲料、饮水、皮毛及土壤等所含病毒在数日乃至数周内仍具感染性，在-50~-70℃可保存数年之久。不过，高温和直射阳光（紫外线）能有效杀灭病毒，阳光直射60分钟、85℃加热15分钟或煮沸3分钟即可将其杀死。FMDV对酸和碱特别敏感，2%-4%氢氧化钠、5%氨水、0.2%-0.5%过氧乙酸等都是有效的消毒液。

FMD的传染源主要是患病动物和带毒动物，传播途径多样，常通过消化道和呼吸道以及损伤的皮肤、黏膜感染。在自然条件下，偶蹄目动物对FMDV易感性最高，其中黄牛、奶牛、牦牛、水牛、猪、羊、骆驼等感染风险依次降低。在野生动物中，黄羊、麝、鹿、野牛、野猪、驼羊、羚羊、野山羊等也均可感染。FMD的临床症状严重程度取决于病毒株类型、暴露量以及感染动物的年龄、种类和免疫力。在易感动物中，发病率可达100%。成年动物死亡率一般较低，为1%-5%；但犊牛、羔羊和仔猪的死亡率较高，可达20%或更高。潜伏期通常为2-14天，典型症状包括在鼻子、舌头、嘴唇、口腔内、脚趾间、蹄上、乳头上和皮肤上出现水疱。水疱破裂会导致严重跛行，动物不愿移动或进食。水疱一般在7天内愈合（有时更长），但可能出现开放性水疱继发细菌感染等并发症。其他常见症状还有发烧、抑郁、流涎、食欲不振、体重减轻、生长迟缓和产奶量下降等，这些症状甚至在动物恢复后仍会持续存在，心肌炎还可在水疱形成前导致幼小动物死亡。

当前，多数发展中国家主要采用注射灭活疫苗的方法来预防FMD的爆发和流行，但灭活疫苗存在诸多缺点，如灭活不彻底可能导致散毒，保护期较短等。DNA疫苗虽能同时诱导机体产生特异性的体液和细胞免疫反应，但其单独使用时在大动物体或人体诱导的免疫反应效果欠佳，需利用佐剂等方法增强其免疫原性。而合成肽疫苗是以FMDV抗原表位的蛋白质序列为依据，用人工方法合成多肽并连接到大分子载体上作为抗原，加入佐剂制备而成。理想的合成肽应具有良好的免疫原性，当合成肽具有空间构象，或者其抗原表位以二聚体或者多聚体形式存在时，免疫原性会更强；还应具备广泛的免疫交叉性，比如将不同血清型FMDVVP1蛋白特定序列连接起来制成的杂合体，可诱导机体产生抗多种血清型的抗体。

在此背景下，深入研究FMDV抗原表位多肽及分子佐剂对小鼠上呼吸道免疫的影响具有重要意义。通过探究二者对上呼吸道免疫的作用，能够从黏膜免疫角度为FMD的防控提供新的思路和方法，有助于研发出更高效、安全的新型疫苗及免疫策略，从而更有效地防控FMD，降低其对畜牧业的危害，保障畜牧业的健康发展和相关畜产品的贸易安全。

1.2研究目的与意义

本研究旨在深入探究FMDV抗原表位多肽及分子佐剂对小鼠上呼吸道免疫的影响，具体目的如下：首先，明确FMDV抗原表位多肽在小鼠上呼吸道免疫过程中激发免疫反应的具体机制，包括如何激活免疫细胞、诱导免疫因子的产生等；其次，揭示分子佐剂与抗原表位多肽联合作用时，对小鼠上呼吸道免疫应答强度、持久性及免疫细胞功能的调节机制；最后，筛选出能够有效增强小鼠上呼吸道免疫效果的抗原表位多肽与分子佐剂组