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··········································情境十一:抗生素类药物的分析任务二:抗生素类药物鉴别试验抗生素类药物鉴别试验
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别紫外吸收鉴别
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别1)羟肟酸铁反应2)茚三酮反应3)双缩脲反应4)光谱法(UV、NMR)5)色谱法(HPLC、TLC)β–内酰胺类羟肟酸显色NH2OH·HClNaOHFe3+H+α-氨基蓝紫色茚三酮Δβ–内酰胺类紫色碱性酒石酸铜呈色反应
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别羟肟酸铁反应β-内酰胺类呈色羟肟酸衍生物Fe3+/3H+NaOHH2NOH.HCI??内酰胺类
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别H+Fe3+/3(红、棕、褐)
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别茚三酮反应α-氨基?-氨基茚三酮?蓝紫色
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别双缩脲反应双缩脲反应(开环分解)?-内酰胺类碱性酒石酸铜紫
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别双缩脲反应与重氮苯磺酸反应酚羟基头孢哌酮橙黄色重氮苯磺酸?C6H5?(偶合)
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别与变色酸-硫酸反应活泼“-CH2-”青霉素阿莫西林氨苄西林△(分解)变色酸显色
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别各种盐的反应K+、Na+的火焰反应Na+焰色→鲜黄色+醋酸氧铀锌→↓黄焰色→紫色+0.1%四苯硼钠+Ac→↓白K+
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别沉淀反应(青霉素盐)遇酸→↓在过量HCl或有机溶剂中溶解白青霉素青霉素钠青霉素钾+H+
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别重氮化-偶合反应芳伯氨基重氮化-偶合反应
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别与三硝基苯酚反应二苄基乙二胺△
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别UV法样品、分解产物?头孢氨苄λmax=262nm青霉素V钠A280nm/A264nm=1.30~1.50苯唑青霉素苯唑青霉烯酸A339mH+Cu2+
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别3180cm-1?N-Hβ–内酰胺?C=O1780cm-13470cm-1?O-H1690cm-1仲酰胺?C=O1250cm-1?C-OIR法阿莫西林
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别1.TLC法对照品对照法对照品供试品相同条件比较Rf和斑点颜色对照品供试品相同条件比较tR2.HPLC法
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别鉴别-----头孢氨苄鉴别的TLC条件CHP(2000)USP(24)5mg/ml2μl硅胶G0.1mol/L枸橼酸液-0.2mol/LNa2HPO4-丙酮(120:80:3)0.1%茚三酮溶液显色25mg/ml5μl硅胶醋酸乙酯-水-乙腈-冰HAc(48:18:14:14)短波长UV光检出0.4%(W/V)1μl硅烷化硅胶HF25415.4%NH4Ac(pH6.2)-丙酮(85:15)254nm检出BP(1999)
一、β–内酰胺类抗生素的鉴别鉴别-----头孢利定的NMR鉴别法(JP14)NMR鉴别法:取本品50mg溶于0.5ml重水中,测定NMR光谱时,应显示单峰信号多重峰信号多重峰信号δ=3.8附近δ=6.9~7.5δ=7.9~9.0235强度比
二、氨基糖苷类鉴别茚三酮反应:具羟基胺类,α-氨基酸性质N-甲基葡萄糖胺(Elson-Morgan)反应:链霉素+水和茚三酮蓝紫色链霉素N-甲基葡萄糖胺红色水解对二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮OH-
三、四环素类1)浓硫酸反应2)FeCl3反应:(酚羟基)显红色~褐色3)TLC、HPLC4)荧光:(含共轭双键)紫外灯照射下产生不同颜色荧光鉴别
··········································课程:药品检验技术谢谢观看!
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