DB13_T2595-2017_葡萄霜霉病毒保存技术规程_河北省.pdfVIP

DB13/T2595—2017

ICS65.020

B16

DB13

河北省地方标准

DB13/T2595—2017

葡萄霜霉病菌保存技术规程

2017-11-22发布2017-12-22实施

河北省质量技术监督局发布

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DB13/T2595—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由河北农业大学提出。

本标准起草单位：河北农业大学、辽宁省农业科学院植物保护研究所。

本标准主要起草人：冉隆贤、申红妙、李正楠、贾招闪、甄志先、刘长远、杜兴兰。

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DB13/T2595—2017

葡萄霜霉病菌保存技术规程

1范围

本标准规定了葡萄霜霉病菌[Plasmoparaviticola(BerketCurtis)Berl.etdeToni]离体保

存技术的术语和定义、葡萄霜霉病菌保存概述和葡萄霜霉病菌保存技术等内容。

本标准适用于教育、研究机构、农药研发部门和药效测定单位等保存葡萄霜霉病菌。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

葡萄试管苗InvitroGrapePlantlet

是指在试管等容器中经过组织培养获得的葡萄苗。

2.2

水琼脂平板WaterAgarPlate

用作保湿的平板培养基。6g琼脂，1000mL蒸馏水，直径9cm的培养皿每个约倒入10mL。

3葡萄霜霉病菌保存概述

葡萄霜霉病菌只能在活体寄主上存活，在离体培养基上不能生长繁殖和保存，致使相关的研究受

到限制。要保持对该病菌持续的研究并排除其它杂菌的干扰，需对葡萄霜霉病菌进行保存，且保持病

菌的致病力，并提高其存活率和稳定性。本规程针对不同的用途，分别对葡萄霜霉病菌进行了超低温

保存，主要用于病菌的长期保存；真空冷冻干燥保存，主要用于病菌复壮；葡萄试管苗叶片保存，主

要用于病菌纯化，以保证病菌生物学和遗传学等研究结果的准确性。

4葡萄霜霉菌保存技术

4.1超低温保存法

4.1.1葡萄霜霉病样采集

在田间采集感染葡萄霜霉病的新鲜发病叶片，装于保鲜袋中，并放置于0℃～4℃的保温盒中带回

室内。

4.1.2霜霉病样的预处理

用清水冲洗叶片，用灭菌棉签轻刷叶片表面的霉层；

将蘸湿的脱脂棉