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pcr上岗证考试题及答案武汉

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，哪种酶起到关键的催化作用？

A.限制性内切酶

B.DNA连接酶

C.TaqDNA聚合酶

D.RNA聚合酶

答案：C

2.PCR的变性温度一般为多少？

A.50-60℃

B.70-80℃

C.90-95℃

D.100-110℃

答案：C

3.以下哪种物质不是PCR反应的基本成分？

A.模板DNA

B.引物

C.核糖核苷酸

D.Mg2?

答案：C

4.在荧光定量PCR中，用于检测荧光信号的是？

A.光电倍增管

B.比色皿

C.显微镜

D.电泳仪

答案：A

5.PCR产物的特异性取决于？

A.退火温度

B.延伸时间

C.模板量

D.以上都是

答案：A

6.以下哪种PCR技术可以检测基因表达量？

A.普通PCR

B.反向PCR

C.荧光定量PCR

D.巢式PCR

答案：C

7.PCR反应体系的体积通常为？

A.1-5μL

B.10-50μL

C.100-200μL

D.500-1000μL

答案：B

8.引物设计时，引物长度一般为？

A.10-15bp

B.15-30bp

C.30-50bp

D.50-100bp

答案：B

9.以下关于PCR污染的说法，错误的是？

A.气溶胶污染是PCR污染的一种

B.只要操作小心就不会有污染

C.试剂污染会导致假阳性结果

D.交叉污染可能来自不同样本间

答案：B

10.PCR反应中，引物与模板的结合发生在？

A.变性阶段

B.退火阶段

C.延伸阶段

D.冷却阶段

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用包括以下哪些？

A.基因克隆

B.疾病诊断

C.法医鉴定

D.基因表达分析

答案：ABCD

2.影响PCR反应的因素有？

A.引物浓度

B.模板纯度

C.退火温度

D.Mg2?浓度

答案：ABCD

3.以下哪些是荧光定量PCR的特点？

A.灵敏度高

B.特异性强

C.可以定量分析

D.不需要引物

答案：ABC

4.防止PCR污染的措施有？

A.分区操作

B.使用一次性耗材

C.定期清洁仪器设备

D.合理设计引物

答案：ABC

5.在PCR反应中，模板DNA可以来源于？

A.基因组DNA

B.质粒DNA

C.cDNA

D.RNA

答案：ABC

6.以下关于引物设计的原则正确的是？

A.特异性高

B.避免引物自身互补

C.引物GC含量适中

D.引物长度无要求

答案：ABC

7.PCR产物分析方法有？

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.测序

D.酶切分析

答案：ABCD

8.以下哪些属于PCR衍生技术？

A.反向PCR

B.巢式PCR

C.多重PCR

D.实时荧光定量PCR

答案：ABCD

9.PCR反应中，dNTP的作用包括？

A.作为合成DNA的原料

B.提供能量

C.稳定反应体系

D.与酶结合

答案：A

10.以下关于PCR循环的描述正确的是？

A.包括变性、退火和延伸三个步骤

B.每个循环都会使目的基因的数量加倍

C.循环次数越多越好

D.不同的PCR反应循环次数可能不同

答案：ABD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应可以无限循环而不会有任何问题。（×）

2.荧光定量PCR只能检测DNA，不能检测RNA。（×）

3.只要有模板，引物可以随机设计。（×）

4.PCR反应中，退火温度越高，特异性越好。（×）

5.普通PCR也能准确地对基因进行定量分析。（×）

6.气溶胶污染是PCR反应中难以避免的一种污染。（√）

7.在PCR反应中，模板量越多越好。（×）

8.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（×）

9.引物的3端可以有较多的错配。（×）

10.巢式PCR可以提高PCR反应的特异性和灵敏度。（√）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR的基本原理。

答案：PCR是一种体外扩增DNA的技术。以DNA为模板，在TaqDNA聚合酶、引物、dNTP和Mg2?等存在的条件下，经过变性（使模板DNA双链解开）、退火（引物与模板互补序列结合）、延伸（在酶的作用下合成新的DNA链）三个步骤的多次循环，使目的DNA片段得到大量扩增。

2.简述荧光定量PCR中Ct值的含义。

答案：Ct值即循环阈值。在荧光定量PCR反应中，每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数。Ct值与起始模板量成反比，可用于定量分析起始模板的拷贝数。

3.简述引物设计的重要性及主要注意事项。

答案：