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2020北京PCR考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应B.核酸杂交反应C.基因测序反应D.蛋白质印迹反应

2.PCR反应体系中不包括以下哪种成分（）

A.模板DNAB.引物C.限制性内切酶D.dNTP

3.以下哪种酶常用于PCR反应（）

A.碱性磷酸酶B.TaqDNA聚合酶C.逆转录酶D.核糖核酸酶

4.PCR反应的变性温度一般为（）

A.55℃左右B.72℃左右C.94-98℃D.4℃

5.引物设计时，其长度一般为（）

A.5-10bpB.15-30bpC.35-50bpD.50bp以上

6.PCR反应中延伸时间主要取决于（）

A.模板浓度B.引物长度C.扩增片段长度D.酶的活性

7.以下关于PCR的说法错误的是（）

A.可用于基因克隆B.只能扩增已知序列C.灵敏度高D.操作相对简便

8.若要扩增某一基因，引物的序列应与（）互补。

A.模板DNA两条链B.模板DNA其中一条链C.mRNAD.tRNA

9.提高PCR反应特异性的方法不包括（）

A.优化引物设计B.降低退火温度C.减少模板用量D.使用热启动酶

10.进行PCR反应的仪器是（）

A.离心机B.移液器C.核酸蛋白分析仪D.热循环仪

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.疾病诊断B.法医鉴定C.基因克隆D.物种进化研究

2.以下属于PCR反应体系成分的有（）

A.Mg2?B.缓冲液C.引物D.模板DNA

3.影响PCR反应结果的因素有（）

A.引物质量B.模板纯度C.反应温度D.循环次数

4.设计PCR引物时需要考虑的因素有（）

A.引物长度B.引物GC含量C.引物的特异性D.引物的Tm值

5.PCR反应的基本步骤包括（）

A.变性B.退火C.延伸D.复性

6.以下哪些酶可用于PCR反应（）

A.TaqDNA聚合酶B.PfuDNA聚合酶C.Klenow片段D.逆转录酶

7.提高PCR扩增效率的方法有（）

A.优化引物浓度B.适当提高Mg2?浓度C.增加模板量D.调整反应时间

8.PCR产物的分析方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.测序D.核酸杂交

9.在临床诊断中，PCR可用于检测（）

A.病毒核酸B.细菌核酸C.肿瘤相关基因D.自身抗体

10.关于PCR技术的特点，正确的是（）

A.高效性B.特异性C.灵敏性D.简便性

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR技术只能扩增双链DNA模板。（）

2.引物的Tm值越高，PCR反应的退火温度就可以越高。（）

3.PCR反应中，循环次数越多，扩增产物就一定越多。（）

4.TaqDNA聚合酶具有3→5外切酶活性。（）

5.只要引物设计正确，PCR反应就能得到理想的扩增产物。（）

6.进行PCR实验时，对实验环境要求不高。（）

7.模板DNA的纯度不影响PCR反应结果。（）

8.热启动PCR可以提高反应的特异性。（）

9.PCR产物的长度取决于引物的长度。（）

10.核酸提取质量对PCR结果无影响。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR技术的基本原理。

答案：以拟扩增的DNA为模板，以一对分别与模板5端和3端互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶作用下，按照半保留复制的机制，经过变性、退火、延伸三个步骤的多次循环，使目的DNA片段得到快速大量扩增。

2.简述引物设计的基本原则。

答案：长度15-30bp；GC含量40%-60%；避免引物自身互补、二聚体形成；具有特异性，与模板准确互补；上下游引物Tm值相差不超过5℃。

3.分析PCR反应中出现非特异性扩增的原因