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1.有关概念:转化(transformation):外源DNA通过细胞吸收过程进入细胞,并使其发生遗传改变的过程。感受态(competence):细胞具有吸收外源DNA能力的生理状态。感受态细胞:能接受外源DNA分子而被转化的细菌细胞。感受态因子:在某一细菌群体中,只有极少数细胞是感受态的,它们所含有促进转化作用的酶或蛋白质分子称为感受态因子。受体部位:受体细菌细胞壁并非在任何区域都允许外源DNA通过,而只是在特殊区域形成临时性通道。第31页,共48页,星期日,2025年,2月5日2.转化过程:(1).双链DNA分子和细胞表面受体部位可逆性的结合;(2).供体DNA片段被吸收入受体细胞;(3).侵入受体细胞的供体双链DNA转变为单链形式,其中一条链被降解;(4).未被降解的一条单链DNA部分地或整个地插入受体细胞的DNA链中,与同源区段形成杂合的DNA分子;(5).杂合的DNA复制以后,形成一个亲代类型(受体)的DNA和一个供体与受体(重组类型)DNA结合的杂种双链DNA,从而导致基因重组形成各种类型的转化子。第32页,共48页,星期日,2025年,2月5日3.确定连锁关系:通过转化时DNA浓度降低时的转化频率的改变,判断基因之间的关系:A与B连锁(位于同一DNA片段):则DNA浓度降低时,A、B同时转化频率的下降程度与A或B各自转化频率下降程度相等;A与B不连锁(位于不同DNA片段):则DNA浓度降低时,A、B同时转化频率的下降程度远超过A或B各自转化频率的下降程度。第33页,共48页,星期日,2025年,2月5日4.转化作图:第34页,共48页,星期日,2025年,2月5日第1页,共48页,星期日,2025年,2月5日第一节细菌的细胞和染色体第二节大肠杆菌的突变型及筛选第三节细菌的杂交和性别第四节中断杂交与重组作图第五节F’因子和性导第六节转化与转导作图第2页,共48页,星期日,2025年,2月5日第一节细菌的细胞和染色体一、细菌的细胞:真核生物(eukaryotes)细胞有细胞核,进行减数分裂和有丝分裂;细菌是原核生物(prokaryotes),没有细胞核,不进行减数分裂和有丝分裂。而是简单地复制和一分为二。细胞壁(cellwall)细胞膜(plasmamembrane)拟核(Nucleoid)性纤毛(pili)核糖体(Ribosome)鞭毛(Flagella)细菌染色体的着膜复制第3页,共48页,星期日,2025年,2月5日二、细菌的染色体:
细菌为单倍体,其染色体为环形双链DNA分子,不形成核小体结构。(P146图)
三、细菌是遗传学研究的好材料:1.结构简单;2.世代时间短;3.后代个体多;4.各种突变类型多。第4页,共48页,星期日,2025年,2月5日第二节大肠杆菌的突变型及筛选一、大肠杆菌的突变类型:合成代谢功能突变型(anabolicfunctionalmutant):基本培养基完全培养基 营养缺陷型(auxotroph)野生型(wildtype) 缺陷型(deficient) 原养型(prototroph) Met-甲硫氨酸突变型 Met+ Thi-硫胺突变型 Thi+ Pur-嘌呤突变型 Pur+第5页,共48页,星期日,2025年,2月5日2.分解代谢功能突变型(catabolicfunctionalmutant): lac-乳糖突变型,野生型为lac+3.抗性突变型(resistancemutant):Strr(Str-)抗链霉素突变型,Strs(Str+)链霉素敏感型Penr(Pen-)抗青霉素突变型,Pens(Pen+)青霉素敏感型T1r抗T1噬菌体,T1s对T1噬菌体敏感第6页,共48页,星期日,2025年,2月5日二、突变型筛选:1.根据菌落特点筛选:如Lac-突变菌株在伊红-美蓝培养基(EMB)上形成白色或粉红色菌落,而lac+菌落为有金属光泽的紫色菌落。2.抗性突变型的筛选:将细菌涂布在含有
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