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分子克隆指南

分子克隆是指将DNA片段(基因)与载体DNA连接形成重组DNA分子,并导入宿主细胞进行复制和扩增的技术。这一技术在现代生物学研究中具有举足轻重的地位,广泛应用于基因功能研究、蛋白质表达、基因治疗等多个领域。以下将详细介绍分子克隆的具体操作流程及相关要点。

实验前的准备

材料准备

1.DNA模板:可以是基因组DNA、cDNA或已有的克隆质粒。如果是从生物组织中提取基因组DNA,需要使用合适的提取试剂盒,并严格按照操作说明进行。例如,从动物组织中提取基因组DNA,通常会用到蛋白酶K消化、酚-氯仿抽提等步骤。对于cDNA的制备,则需要先提取RNA,然后通过反转录酶将RNA反转

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