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病毒类疫苗
(一)更换培养液情况判断
(二)传代培养
(三)细胞的冻存
(四)细胞的复苏
(五)细胞的污染及排除
(六)病毒的培养
(七)收获病毒
(1)培养液颜色的改变;
(2)细胞浓度;
(3)细胞类型;
(4)细胞形态学;
(一)提示需要换液或传代的因素
动物
细胞传代培养
(1)培养液颜色的改变
当培养液的营养物质消耗殆尽,pH值下降,酚红指示剂由桃红色变为透明清亮的黄色,但溶液不浑浊。
(2)细胞的浓度
贴壁依赖性细胞(贴壁率80%仅需换液,贴壁率80%则需传代)
悬浮型细胞(进行细胞计数,若细胞密度107需进行传代培养;若细胞数变化不大,密度为105~106时仅需进行换液)
(3)细胞的类型
如肿瘤细胞生长迅速,则三天后可直接进行传代;若培养的细胞生长缓慢两三周才能长满培养瓶,则中间仅仅需要换液即可。
(4)细胞的形态学
细胞四周充满颗粒,细胞质呈空泡化,原先是梭形的细胞变圆,或出现细胞与底物脱离时。(需要在高倍镜下,细心观察)
为什么贴壁细胞数超过80%即可传代培养而不说成是100%?
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