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《食品毒理学》课程实习论文

氯化镁的急性毒性评价

学生：xxxx指导教师：xxx

摘要：在所挑选合适试验的小鼠中，随机选取小鼠称重、标记，随机分组，依据LD50计算的设计原则将动物分成四个染毒组，给以不同剂量的灌胃染毒，观察实验动物中毒症状，观察中毒状态和所做的反应情况，最后统计中毒死亡数量以及可能的死亡原因，计算出受试物毒性反应与剂量的关系，采用霍恩氏法求出氯化镁的半数致死剂量(LD50)和可信限，并根据LD50值将氯化镁进行急性毒性评价。

关键词：霍恩氏法急性中毒小鼠氯化镁

1、前言：

氯化镁的性质和毒性

大多数毒性物质，无非就是凝血或者破坏神经元。氯化镁本身的毒性来自其本身凝血的作用，例如卤水点豆腐，就是使蛋白质凝固。假如一定剂量的氯化镁进入血液，血液凝固，人必死无疑。所以说氯化镁对于温血动物来说还是有一定的杀伤力。最著名的案例就是杨白劳喝卤水自杀，卤水就是氯化镁。氯化镁溶液要妥善保管，当做有一定危险的化工产品存放。常温下为白色结晶。易吸湿。100℃时失去2分子结晶水。在110℃开始失去部分盐酸而分解，强热转为氧氯化物，当急速加热时约118℃分解。1G溶于0.6ml水、0.3ml沸水、2ml乙醇。其水溶液呈中性，pH约为7。相对密度1.56。半数致死量(大鼠,经口)2800mg/kg。。

2、试验器材和试验方法

2.1材料的选取

实验动物：在老师所给的动物中选用健康成年小鼠，试验前要对动物饲养观察3-7天，以适应饲养环境，并淘汰不健康或体重不符合要求的动物；

2.2仪器与试剂

仪器：注射器，灌胃针，电子天平，吸管，吸球，容量瓶，烧杯，棉棒，试剂瓶，棉纱手套，剪刀，镊子，铅条等；

试剂：氯化镁溶液，蒸馏水，生理盐水小鼠食料；

2.3试验方法

2.3.1实验动物与分组

首选健康成年小鼠，同性别实验动物个体间体重相差不得超过平均体重的10%，试验前动物要在试验环境中至少适应3-7d时间，以适应饲养环境，并淘汰不健康或体重不符合要求的动物的小鼠，试验时，将小鼠称体重、编号、按随机分组原则，按随机分组表将实验动物分成4组，每组4只。

2.3.2剂量的选择

经过预试或查资料得到LD50的大致范围，经查资料得口服-小鼠LD50为:4700mg/kg；

各剂量组的间距可根据LD50计算方法要求按等比级数或等差级数安排。本实验用霍恩氏发法计算LD50，所用递增公比为3次根号10，则染毒剂量组剂量分别为1000mg/kg、2150mg/kg、4640mg/kg、10000mg/kg。

2.3.3氯化镁溶液的配制

配制步骤：

根据受试物氯化镁的理化性质和相关毒理学数据以及霍恩法分组和四个剂量组每组小鼠的平均质量得下表。

组号

一

二

三

四

染毒剂量

1000mg/kg

2150mg/kg

4640mg/kg

10000mg/kg

每组小鼠染毒毫克数

27.75mg

57.587mg

122.96mg

280mg

因此分别称取2.775g，5.7587g，12.296g，28.000g各溶于40ml蒸馏水里面即可。

2.3.4灌胃

我们分别对四个小组的小鼠进行灌胃，将试剂氯化镁灌入小鼠体内，不同小组的剂量不同，组内灌胃的剂量相等，分别为容量为20ml/kgBW。，本实验灌胃液体积统一为0.4ml。若一次给予量太大，也可在24h内分2-3次给予，每次间隔4-6h，但合并作为一次剂量计算。试验动物在试验前一般禁食16h左右，不限制饮水。染毒后继续禁食3-4h。若采用分多次染毒，根据染毒时间长短，必要时可给动物一定量的的食物。

2.4检测指标

染毒后要注意观察小鼠中毒表现和死亡情况。观察指标通常包括小鼠外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况（死亡时间、濒死亡前的反应）、体重变化（给药前、试验结束处死动物前各称重一次）等，观察时间为5天，对死亡小鼠和观察期满存活小鼠处死进行大体解剖，认真做好试验记录。试验结束后，要按照试验结果，填写急性毒性试验记录表。根据试验结果计算LD50并确定急性毒性分级。经过近五天的观察得出急性毒性试验记录表如下：

组别

动物编号

体重/g

染毒剂量mg/kg

灌胃容量/ml

中毒症状

症状出现时间

死亡时间

试验结束后体重/g

第1组

10

27

1000

0.4

染毒后开始表现就是爱睡觉，精神萎靡，适量也不怎么好，观察一段后后小鼠饮食、活动回归正常，在之后几天就一切生命活动恢复正常。

染毒后既表现出轻微中毒，过段时间便好转。

未死亡。

27

13

27

0.4

26

15

28

0.4

28

16

29

0.4

29

第2组

1

28

2150

0.4

染毒后表现精神状态不是很好，抱在一起不怎么动弹，饮水量及进食量减少，观察一天后小鼠饮食、活动回归正常，在之后几天也未见有中毒症状。

染毒后既表现出