1.2 微生物的基本培养技术 课件高中生物人教版（2025）选择性必修3(共32张PPT).pptxVIP

第一章发酵工程

第2节微生物的培养技术及应用;

问题探究

纯培养

配制培养基

灭菌

具

接种

几

分离

具

培养;

聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的技术，

此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，科学家布鲁克从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌(Taq细菌),进而提取出耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)。这种酶目前已被广泛用于聚合酶链式反应(PCR)。

讨论：

1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的?;

启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

1.在被石油污染的土壤中可以筛选_分解石油微生物。

2.在冰川冻土层可以筛选耐寒微生物。

3.以纤维素为唯一碳源培养基纤维素分解菌…_;

(3)实例：

70~80℃的高温→分离耐热菌改变培养条件

不加碳源的培养基—→分离出自养微生物

营养缺陷

不加氮源的培养基一→分离固氮微生物

加青霉素的培养基—→分离真菌(青霉素能杀死细菌、放线菌)添加某种化学物质

加高浓度食盐—→分离金黄色葡萄球菌

加石油为唯一碳源—→分离出分解石油的分解菌特殊碳、氮源;

培养基培养基+氨苄青霉素

培养基中加氨苄青霉素

没有氨苄

青霉素抗

性的细菌

能够生长;

思考讨论：怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?

应该设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)或完全培养基作为对照，若

基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基

具有选择性。;

怎样才能将分解尿素的细菌从土壤中分离出来?尿素一

设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。

该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?

这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。;

1.从物理性质来讲，两者属于固体培养基，判断依据是添加了凝固剂琼脂;该类培养基的主要用途为分离、鉴定、计数、保???。

2.从用途上来讲，培养基二属于选择培养基，目的是为了获得能分解尿素的微生物

3.两种培养基共有的培养基成分有：

碳源、氮源、无机盐、水。

培养基一的主要碳源为牛肉膏，主要氮源为蛋白胨.

培养基二的碳源为葡萄糖，氮源为尿素。;

稀释涂布平板法：

将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分

别涂布到固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。

选择培养基十稀释涂布平板单菌落;

1mL.mLmLmL1mLmL

×1021×1031×1041×1051×1061×107

1×10;

网兵

XO区区m区0

1×10

9mL无菌水

用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。;

3、微生物培养

〇待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d。

注意事项：涂布结束后，应将一个未接种的培养基和已接种

的培养基放在一起培养，以检测培养基是否灭菌彻底。;

缺点统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

因为当两个或多个细胞连在一起，平板上观察到的只是一个菌落。

因此，统计结果一般用菌落数而不用活菌数来表示。;

思考：平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的?为什么?

不能，平板划线法最开始的划线

很可能菌类会长成一片，导致无

法计数，此外灼烧接种环的时候

也会杀死一部分菌类。;

方法;;

无碳培养基+油烟污染物

A.图中①~③的过程为梯度稀释

B.在培养基中加入油烟污染物，其作用是为微生物提供碳源和能源

C.④使用的是固体培养基，需加入琼脂作为微生物生长繁殖的营养物质

D.过程④可采用稀释涂布平板法或平板划线法分离菌种并进行计数;

2.(2022·黑龙江鸡西高二期末)如图为选育高产β-胡萝卜素的布拉霉菌的过程。

随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。未突变菌不能在