DB32T 2403-2013 火焰南天竹组织培养繁殖技术规程　.docxVIP

ICS65.020.20B61

备案号：41062-2014DB32

江苏省地方标准

DB32/T2403—2013

火焰南天竹组织培养繁殖技术规程

TheTechnicalRegulationofTissueCulturePlantletProductionforNandinadomestica‘Firepower

2013–12–30发布014–01–30实施

江苏省质量技术监督局发布

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DB32/T2403—2013

前言

为了规范火焰南天竹组培苗的生产技术，促进火焰南天竹组培苗的生产持续健康发展特制定本标准。

本标准编写格式按GB/T1.1-2009《标准化工作导则：标准的结构和编写》的规定编写。本标准由江苏农林职业技术学院提出。

本标准由江苏农林职业技术学院起草。

本标准主要起草人：史清云、朱艳、史云光、鲍荣静、张荣良、蔡宏宇。

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DB32/T2403—2013

火焰南天竹组织培养繁殖技术规程

1范围

本标准规定了火焰南天竹组织培养繁育技术规程的培养基配制、培养材料及消毒、初代培养、组培苗增殖与继代培养、组培苗生根、组培苗炼苗移栽、移栽苗管理。

本技术规程适用于火焰南天竹组培苗生产。

2培养基配制

2.1培养基选择

根据火焰南天竹生长发育特性选择MS基本培养基和激素配比。

2.2母液的配制和保存

2.2.1母液的配制

母液配制成几种化合物的混合母液。大量元素母液配制50倍，微量元素母液配制100倍，植物生长物质配制浓度0.5mg/ml～1.0mg/ml。

2.2.2母液的保存

母液配制好后存放于4℃的冰箱中。

2.3消毒灭菌

采用高压蒸汽灭菌器进行灭菌。已灭菌的培养基瓶不得与未灭菌的培养基瓶混放，合格的灭菌培养瓶应注明灭菌日期，合格标志。

3培养材料及消毒

3.1培养材料的选择

选取生长健壮、无病虫害、能保证原品种优良性状的火焰南天竹的茎尖部位作为培植材料。

3.2外植体的消毒

70%酒精浸泡数秒钟，无菌水冲洗2次～3次，再用0.5%～2%的次氯酸钠浸泡10min～15min，用无菌水冲洗3次后接种。

4初代培养

4.1初代（诱导）培养基

MS+TDZ0.1mg+BA1.0mg+IBA0.02mg。

4.2外植体的接种

培养材料经过消毒后，在无菌滤纸上切割成所需大小，然后进行接种。

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DB32/T2403—2013

5组培苗增殖与继代培养

5.1增殖培养

每升基本培养基+ZT0.5mg+BA1.0mg+IBA0.05mg+Charcoal1000mg。

5.2继代培养

每升基本培养基+ZT0.2mg+BA0.5mg+IBA0.1mg+Charcoal1000mg；继代培养周期一般30d继代1次。

6组培苗生根

6.1生根材料的选择

在继代培养的组培苗中剪取或切取生长健壮、叶色正常、叶片舒展、适于生根的无根苗，接种在生根培养基上进行生根培养。

6.2诱导生根

生根处理产生根原基培养：每升基本培养基+NAA0.2mg+IBA0.4mg+Charcoal2000mg。

7组培苗炼苗移栽

7.1组培苗炼苗

组培苗在移栽前将培养瓶放置温室自然散射光下，温度控制在25℃±3℃,闭口炼苗7d左右，去掉瓶盖再炼苗3d～5d，然后再移栽。

7.2组培苗移栽

用镊子将生根苗从培养瓶中取出，洗去基部培养基，在800倍多菌灵溶液中浸泡30min后移栽到基质中。基质采用蛭石、草炭、珍珠岩或混合基质等。控制温度25℃±2℃,相对湿度前期80%～90%，以后逐渐降低湿度。当试管苗根系发达，形成侧须根以后，可以移栽到营养钵中，成为容器苗。

8移栽苗管理

8.1肥、水管理

组培苗移栽7d后开始喷施专用营养液，也可以喷施NPK比例为1∶1∶2的复合肥营养液，浓度一般不高于0.5‰，施肥浓度可随着苗龄的增加适当加大；基质不宜太湿，以攥在手中指间不滴水为原则，喷水与施肥相结合。

8.2病虫害防治

温室使用前彻底消毒，用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3次～4次，温室