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722s型分光光度计示意图2019预热30min012020选择波长（常常选择最大吸收波长）022021分光光度计的校正或校准（调零和调整）032022测量吸光度或透射比04分光光度计的操作步骤？？分光光度计的调零和调整调零指调节透射比为0，调整指将透射比调为100％光路断开或照射在纯黑体上时进行调零照射在透明物质时（如蒸馏水等，分光光度法中称为参比物或空白）进行调整T=0：It＝0T=100％：It＝I0显示窗01Mode按钮02调整按钮03调零按钮04样品盖05拉杆06波长旋钮07通过按Mode按钮，仪器可显示透射比T或吸光度A等调零或调整时，通过按调零按钮或调整按钮使仪器显示为0.00或1.00滤光片比色皿比色皿架光路通孔磺基水杨酸与三价铁离子配合物的组成及稳定常数的测定实验目的了解分光光度法测定有色化合物浓度的原理和方法学习连续变化法（又称等摩尔系列法）测定配合物的稳定常数和组成比熟练使用722型分光光度计配合物的组成M+nL=MLn中心离子配位体配合物Fe3＋+nL=FeLn磺基水杨酸无色n与pH有关pH=2~3时，n=1磺基水杨酸为三元有机弱酸：H3L（结构如右）pH2～3时生成紫红色的FeLpH4～9时生成红色的FeL23-pH9～11.5时生成黄色的FeL36-pH12时生成Fe(OH)3沉淀实验原理Io=Ia+It+Ir设Ir一定：Io≈Ia+It分光光度法入射光I0透过光It反射光Irl吸收光Ia朗伯-比耳定律透射比（透光度）：吸光度：吸光系数吸光物质厚度吸光物质浓度l一定：在测定系列的液中，每个测定试样中M的浓度和配位体浓度都在发生连续变化，但它们的总浓度保持恒定01f—M浓度与总浓度之比02A越大f就越与组成接近，Amax对应的f即为组成03连续变化法平衡浓度：C(1-α)CαnCαC－不考虑离解生成的配合物的最大浓度配位离解平衡配合物的离解度当配合物不离解，吸光度应为A′，但实测为A，说明配合物发生了离解离解度吸光度吸光度-组成图A′Af分光光度计的工作原理光源显示装置检测器单色器吸收池分出某一特定波长的光，又称光栅一般为钨灯，产生360-1000nm的光谱将电信号放大并显示出来盛放试液的容器，又称比色皿将透过光转换为电信号
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