植物组织培养实验室的组成、仪器设备及基本操作.pptVIP

大量元素中的氮通常采用硝态氮或铵态氮，但铵态氮浓度过高会对有些植物的培养物造成伤害，不适宜使用过高的浓度，可以用谷氨酸、丝氨酸等来代替。各种微量元素均具有特定的生理功能，如硼与蛋白质的合成及糖类的运输有关；铜能促进离体根的形成；锰参与植物的光合作用和呼吸作用；钼为氮素代谢的重要元素。02植物组织的对其需要量极少，过多会产生毒害，如造成蛋白质变性、酶失活,代谢障碍等。012、微量元素：微量元素中，铁的用量较大，它对叶绿素的合成起重要作用，由于在较高pH下，FeCl3极易形成Fe（OH）3沉淀，难以被吸收，所以多用乙二胺四乙酸二钠盐与硫酸亚铁形成的螯合物，并且单独配制。主要包括各种维生素和氨基酸常用的维生素：硫胺素（VB1）、吡哆醇（VB6）、烟酸（VB3）、泛酸钙（VB5）、生物素、钴胺素（VB12）、叶酸等。（二）有机成分：01有时添加水解乳蛋白或水解酪蛋白，为牛乳经酶法加工的水解产物，含有20种氨基酸的混合物，用量10－1000mg/L,通常用于原生质体等培养。此外肌醇是另外一种重要的有机成分，在维持离子平衡，糖类的转化中起重要作用，此外还参与磷脂代谢及等生理作用。它可以促进愈伤组织的形成，不定芽、不定胚的分化。常用的氨基酸：甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。02植物激素是植物代谢中产生的天然化合物，它能直接影响植物细胞的分化、分裂以及影响植物的形态建成、开花、结实、成熟、衰老脱落、休眠、萌发等生理活动。在植物组织培养中，主要通过植物激素及生长调节物质对离体的组织、器官的形态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚胎发生等。（三）植物生长调节物质：常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物激素：01生长素类：02细胞分裂类：03赤霉素类：04脱落酸：05多胺06乙烯：0701.生长素类：02.组织培养中的功能是：促进细胞伸长生长和细胞分裂，诱导形成愈伤组织，促进生根。03.常用的有NAA、IAA、IBA、2,4－D等。细胞分裂素类：01功能：诱导芽的分化、促进侧芽萌发；促进细胞分裂和扩大，促进茎增粗，抑制茎伸长；延缓衰老。02常用细胞分裂素有BA、KT、ZT、2ip等。03如TDZ，CPPU，4－PU等。02此外近年来发现苯基脲衍生物具有非常高的细胞分裂素活性，在多种植物上应用。01主要具有诱导茎的细胞伸长，对根无效；对形成层细胞分化有影响，与生长素协同作用；可以诱导离体成花；打破休眠等功能。010102常用GA3、GA4等。023、赤霉素类：脱落酸（ABA）：促进休眠、衰老和脱落。组织培养中较少使用，主要用于种质资源的离体保存。乙烯：主要促进衰老和脱落，高浓度易形态变化。碳源主要为细胞提供合成新化合物的骨架，为细胞的呼吸代谢提供底物与能源，此外还能维持一定的渗透压。常用的碳源主要是蔗糖，使用浓度在10－50g/L，此外果糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖、甘露糖及可溶性淀粉等也常用于植物组织培养。（四）碳源：这节课第二章植物组织培养实验室的组成、仪器设备及基本操作一、植物组织培养实验室的结构及设计要求：完整的植物组织培养室通常包括洗涤室、化学实验室、接种室、培养室、细胞学实验室等部分。可以根据实际需要和条件进行设计。但从功能上至少包括准备室（化学实验室）、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。第一节实验室结构、仪器设备及操作技术主要功能：用于培养器皿的清洗、干燥、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。准备室（化学实验室）：药品柜、实验台、水槽、超声波洗涤仪、凉干架、干燥箱、各种玻璃器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）、蒸馏水制造装置。天平、移液器、pH计、水浴锅、微波炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、及培养基分装用品等、高压灭菌锅、冰箱。2.主要仪器设备及用品：接种室（无菌操作室）：01功能：接种材料的灭菌、接种以及培养物的继代转接等。接种室要求保持洁净，与化学实验室之间应设置缓冲室。02仪器设备及用品：超净工作台、紫外灯、小推车、搁架、磁盘、接种工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器等）等。培养室：1功能：2主要用于植物材料的培养。3要求室内洁净并能保持一定的温度、光照以及湿度，以促进植物材料的生长和分化。4仪器设备及用品：培养架及灯管、摇床（振荡器）、空调、自动定时器、加湿及除湿器、光照培养箱等。2020细胞学实验室：012021