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注意：(1)某些无机成分如Ca2+、SO42一、Mg2十和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。特别应将Ca2+、SO42一、Mg2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。另外，CaCl2·2H2O放入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。微量元素母液的配制

MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物（除Fe）组成。微量元素用量较少，特别是?CuSO4·5H2O、?CoCl2·6H2O?，因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。按照表2，表3配方，用感量为0.0001g的分析天平称量，其它同大量元素。配制培养基时，每配制1L培养基，取微量Ⅰ10ml，微量Ⅱ１ml铁盐母液的配制

铁盐不是都需要单独配成母液，如柠檬酸铁，只需和大量元素一起配成母液即可。目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。这种螯合物使用起来方便，又比较稳定，不易发生沉淀。配制方法同上，直接用蒸馏水加热搅拌溶解。配制培养基时，配制1L取此液10ml。在配制铁盐时，如果加热搅拌时间过短，会造成FeS04和Na2EDTA鳌合不彻底，此时若将其冷藏，FeS04会结晶析出。为避免此现象发生，配制铁盐母液时，FeS04和Na2EDTA应分别加热溶解后混合，并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20-30min)，调pH值至5.5，室温放置冷却后，再冷藏。MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、盐酸硫胺素和盐酸吡哆素。培养基中的有机成分原则上应分别单独配制。配制直接用蒸馏水溶解，注意称量时用电子分析天平。并贮存在棕色无菌瓶中。01配制生物素、叶酸，用稀氨水溶解，然后定容。024、有机母液的配制5、植物生长调节剂母液配制

一般植物生长调节剂母液的配制的终浓度以0.5mg/ml为好，需要注意的是：

（１）配制生长素类，例如IAA、NAA、2.4-D、IBA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。以后者效果好。

（２）细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，或直接用1mol/LHCl溶解，再用蒸馏水定容。

（３）GA3以95%酒精溶解（不耐高温，过滤灭菌）

保存在棕色试剂瓶中。注意：

所有母液都要贴上标签，注明名称、配制倍数、日期，所有的母液都应保存在0~4℃冰箱中，若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。KM-8p主要用于原生质体培养，含几乎所有单糖和维生素、呼吸代谢中的主要有机酸。凡花药培养中常用培养基，成分较简单，且KN03和(NH)2N04含高。White的无机盐含量较低，适于生根培养。五、植物细胞培养基计量

根据配制培养基的量和母液的浓度计算需要吸取母液的量，计算公式：吸取量ml=培养基中物质的含量（mg/L）×1000ml/母液浓度（mg/L）。移液

取烧杯一只，加入少量的蒸馏水，按照计算吸取母液的量依次吸取各母液置于烧杯中备用。培养基的配制称取琼脂蔗糖备用融化

用量杯量取600～700ml的蒸馏水放在电炉上，加入琼脂，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状将其取下，加入蔗糖。

大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。将融化的琼脂和母液充分混合，用蒸馏水定容到1000ml，来回混合几次。5、混合用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH或HCl溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用精密的pH试纸(5.4～7.0)测培养基的pH，一直到培养基的pH达到要求为止(在调制时要比目标pH值偏高0.2～0.5个单位，因为培养基在灭菌过程中由于糖等物质的降解，pH值会下降0.2～0.5个单位左右)。6、调pH分装

溶化的培养基应该趁热分装。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5～1/4。每1L培养基，可分装20～30瓶。包扎

用封口膜封口，外边可加一层牛皮纸，扎好绳子，用铅笔或碳素墨水笔在牛皮纸上写上培养基的代号。培养基的灭菌壹外植体直接分离法:机械切割、组织破碎贰愈伤组织分离法：制备小细胞团或单细胞悬液叁原生质体再生法：纤维素和果胶酶混合处理外植体或愈伤组织，分离原生质体，再生培养基中培养，原生质体细胞壁再生。植物细胞的获得六、植物细胞的培