多花黄精组织培养育苗技术规程.docxVIP

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DB43/TXXXXX—2022

多花黄精组织培养育苗技术规程

1范围

本文件规定了多花黄精组织培养育苗过程中组培室消毒处理、外植体采集、外植体处理、培养基制备、组织培养、炼苗与移栽、出苗、包装运输、档案管理等技术要求。

本文件适用于湖南省多花黄精组织培养育苗。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4285农药安全使用标准

GB/T8321农药合理使用准则（所有部分）LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1多花黄精PolygonatumcyrtonemaHua

百合科黄精属的多年生草本植物，中药材黄精基源植物。根状茎肥厚，少有近圆柱形，茎高可达

100cm，叶互生，椭圆形、卵状披针形至矩圆状披针形，伞形花序，花被黄绿色，浆果黑色，5月-6月开花，8月-10月结果。

4组培室消毒处理

组培室用84消毒液稀释至1000倍或75%乙醇喷洒洗涤组培室地面，保持室内清洁。超净工作台用紫外灯照射30min，随后关闭紫外灯通风20min以上，用湿拖把轻轻打扫超净工作台四周，降低尘埃，接着用75％乙醇擦拭台面操作区域。

5外植体采集

5.1取种子萌发形成的幼芽，用解剖刀从芽的萌发的基部切下；

5.2取无病害，无腐烂，根系发达的多花黄精根状茎健壮芽头，在芽点以下2cm-3cm处，用解剖刀切下。

6外植体处理

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6.1清洗

放入器皿中用洗衣粉等清洁剂冲洗20min。

6.2灭菌

清洗好的外植体转入超净工作台进行操作，将芽块放入灭菌后的烧杯内，用75%酒精清洗30s，无菌水冲洗3-5次，0.1%HgCl溶液浸泡10min-15min，最后用无菌水冲洗5次-6次。

7培养基制备

7.1培养基配方

诱导培养基、增殖培养基、生根培养基的配方见附录A。

7.2培养基配置、灭菌与保存

参照LY/T1882执行。

8组织培养

8.1培养条件

培养温度25℃±2℃培养室中，光照时间12h/d，光照强度1500lx-2000lx。

8.2诱导培养

黄精芽块灭菌后在接种盘中切掉芽块下部，只留取0.5cm-1cm大小的芽点，迅速接种到诱导培养基中，培养30d-50d，分化产生5个左右丛生芽时，转入增殖培养基中进行培养。

8.3增殖培养

切取其丛生芽转入增殖培养基中进行增殖培养，反复接种继代培养4-5次后，转入生根培养基中进行生根培养。增殖培养的周期以30d-45d为宜，增殖率为4-7，可继代4-5次。

8.4生根培养

将诱导形成的大小相近的继代苗，在超净工作台上切割为单株，接种到生根培养基中培养，培养

25d-30d根系铺满培养瓶底部即进行炼苗移栽。

8.5炼苗

8.5.1炼苗标准

当组培苗拥有1个以上的健壮芽点，生长4条-5条根以上时，可进行炼苗处理。

8.5.2驯化

将装组培苗的培养瓶从培养架上取下，转移到日光温室中，自然散射光下炼苗，温度控制在20℃-25℃,封口炼苗3d-5d，开瓶炼苗1d-2d后即可移栽。

9移栽

9.1容器

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选用穴盘或底部有空的育苗盘。

9.2基质

按照体积比珍珠岩:蛭石:泥炭土=1:2:3。

9.3方法

取出生根苗，自来水冲洗干净根部培养基，用1000倍甲基托布津或多菌灵溶液浸泡根部5min

~8min，放置于通风阴凉处晾干水分至根系发白变软，再移栽入已准备好的基质中。移栽前将基质浇

~

透水，移栽完成后用花洒进行浇水定根。

9.4管理

9.4.1环境条件

将移栽的组培苗置于有自动喷雾设备和遮阳网的大棚中，保持棚内光照强度在1000～2000lx，空气湿度在75%～85%之间，定期浇水，保持基质湿度为30%-50%。

9.4.2追肥

每隔15d～20d用氮磷钾（N20-P20-K20）或（N25-P10-K20）水溶性肥600倍～800倍溶液浇苗1次。

9.4.3病害管理

对苗期病虫害以预防为主，综合防治。施用农药应符合GB4285和GB/T8321（所有部分）的规定。

10出苗

当组培苗根状茎长3cm以上，重15g以上时可以出苗。

11包装、标志、运输

11.1包装

包装应用干燥、清洁、无异味、不影响质量、容易回收和降解的材料，外包装应