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红肉火龙果液泡转化酶基因HpVIN1的克隆、表达和酶活性鉴定
目录
红肉火龙果液泡转化酶基因HpVIN1的克隆、表达和酶活性鉴定（1）
内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.2研究目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.3研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
2.1红肉火龙果材料的准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
2.2HpVIN1基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.2.1基因组DNA的提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
2.2.2HpVIN1基因的PCR扩增．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.2.3基因克隆与测序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
2.3HpVIN1基因的表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.3.1表达载体的设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
2.3.2重组载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
2.4HpVIN1基因的表达与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.4.1重组表达载体的转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.4.2HpVIN1蛋白的表达与诱导．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
2.4.3HpVIN1蛋白的纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.5HpVIN1酶活性的鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.5.1酶活性测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.5.2酶活性测定结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
3.1HpVIN1基因的克隆与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
3.2HpVIN1基因的表达与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
3.3HpVIN1酶活性的鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
3.3.1酶活性测定结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
3.3.2酶活性影响因素分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
红肉火龙果液泡转化酶基因HpVIN1的克隆、表达和酶活性鉴定（2）
一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
1.1研究背景与目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
1.2相关研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
1.3研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
二、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
三、结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
3.1基因克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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