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海纳百川,有容乃大;壁立千仞,无欲则刚。——林则徐
简答题
1.为什么利用RNAi抑制一个基因的表达较利用反义RNA技术更为彻底。
答:RNAi是外源或内源性的双链RNA进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降
解.dsRNA进入细胞后,在Dicer作用下,分解为21-22bp的SiRNA.SiRNA结合相关
酶,形成RNA介导的沉默复合物RISC.RISC在ATP作用下,将双链SiRNA变成单链
SiRNA,进而成为有活性的RISC,又称为slicer.slicer与靶mRNA结合,导致其断裂,进
而导致其彻底降解。
反义RNA是与靶mRNA互补的RNA,它通过与靶mRNA特异结合而抑制其翻译表达,
反义RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以,mRNA不一定完全
被抑制。
2.简述真核基因表达的调控机制。
答:(1)DNA和染色质结构对转录的调控:
①DNA甲基化,②组蛋白对基因表达的抑制,③染色质结构对基因表达的调控作
用,④基因重排,⑤染色质的丢失,⑥基因扩增;
(2)转录起始调控:
①反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用
调节),②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控;
(3)转录后调控:
①5’端加帽和3’端多核苷酸化调控,②选择剪接调控,③mRNA运输调控,④mRNA
稳定性调控;
(4)翻译起始的调控:
①阻遏蛋白的调控,②对翻译因子的调控,③对AUG的调控,④mRNA5’端非编
码区的调控,⑤小分子RNA;
(5)翻译后加工调控:
①新生肽链的水解,②肽链中氨基酸的共价修饰,③信号肽调控。
3.简述mRNA加工过程。
答:(1)5′端加帽(由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸,形成帽子结构m7GpppmNP-)。(2)
3′端加入Poly(A)尾(A、组蛋白的成熟mRNA无需加polyA尾;B、加尾信号包
括AAUAAA和富含GU的序列;C、加尾不需模板;D剪切过程需要多种蛋白质因
子的辅助)。
(3)mRNA前体的剪接(剪接加工以除去内含子序列,并将外显子序列连接成为成熟的
有功能的mRNA分子。内含子两端的结构通常是5′-GU……AG-3′。选择性剪接的作
用机制包括;A使用不同的剪接位点,B选择使用外显子,C、反式剪接,D、使用
不同的启动子,E、使用不同的多腺苷酸化位点)。
(4)RNA的编辑(发生于转录后水平,改编mRNA序列,C→U或A→G,增加遗传信
息容量)。
4.简述生物的中心法则。
答:中心法则(geneticcentraldogma),是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给
蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA,即完成
DNA的复制过程。
吾日三省乎吾身。为人谋而不忠乎?与朋友交而不信乎?传不习乎?——《论语》
5.简述
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