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酚氯仿法提取DNA主要步骤和原理.docx

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    酚氯仿法提取

    酚氯仿法提取DNA主要步骤和原理

    酚氯仿法提取DNA主要步骤：

    将动物组织放在1.5ml的离心管中，分别用

    75%、50%酒精和纯水梯度脱酒精。每个梯度脱水时间为5-10min

    将组织放入研钵中，参加适量DNA裂解液

    〔300μl〕，研磨后再参加300μlDNA裂解液冲洗研磨棒。

    将研磨好的组织液用移液枪加到1.5ml离心管，在管中加10μl蛋白酶K，用封口带将离心管封口，放入摇床〔56℃,5h〕。

    参加等体积的Tris饱和酚〔500μl〕，摇匀

    〔10min〕。

    离心：12000R，7min，4℃。离心后分成上中下三层，上层为DNA

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