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荧光分析法测定维生素C;维生素C及维生素的测定原理;二、荧光分析法测定维生素C实验

;1.2实验步骤;2结果与讨论

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2.1激发光谱和发射光谱

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取3.0mL维生素C标准溶液,按实验方法进行操作,分别在290～330nm、360～460nm内扫描得到激发光谱和发射光谱如图1、图2所示。从图1、图2中可看出,当激发波长为308nm,发射波长为408nm时体系的荧光强度最大,试剂空白的荧光值比较低且稳定,故本实验选择激发波长为308nm,发射波长为408nm。

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;;溶液的pH值对体系荧光强度有较大的影响，试验了不同的pH值对荧光强度的影响。由pH值—荧光强度的曲线可知,当pH值为5.9～6.2时,荧光强度达到最大值且比较稳定,因此确定最佳pH值为6.0。

缓冲溶液的种类对体系的荧光强度也有一定的影响。试验了以下几种pH值为6.0的缓冲溶液:

NaOH-KH2PO4、KH2PO4-硼砂、KH2PO4-Na2HPO4、NaOH-邻苯二甲酸氢钾、Na2HPO4-柠檬酸、NaOH-柠檬酸钠、HAc-NaAc等。试验结果表明,当所加的缓冲溶液为NaOH-邻苯二甲酸氢钾时,荧光强度最大且稳定。因此本实验选择NaOH-邻苯二甲酸氢钾为缓冲溶液,其最佳用量为5.0mL。;;三、荧光分析法测定维生素C应用

;荧光分析法测定维生素C具有操作简单,精密度高,检出限低等优点,该法可以应用于水果、蔬菜和药物中维生素C的检测,适于推广。;谢谢观赏！ ;利用某些物质受光照射时所发生的荧光特性和强度，进行物质的定性分析或定量分析的方法，称为荧光光谱分析。