《克隆抗体》课件.pptVIP

*******************克隆抗体克隆抗体是一种人工制造的单克隆抗体,它由一种细胞克隆产生,具有特异性和高亲和力。它在疾病诊断和治疗中广泛应用。JY什么是克隆抗体？定义克隆抗体是指从单个B细胞克隆扩增而来的高度纯化的单一抗体分子。它们具有相同的抗原结合特异性和亲和力。特点克隆抗体能够精确识别特定抗原,并高效地结合和中和目标分子。它们广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。克隆抗体的结构特点克隆抗体是由单克隆细胞分泌的特异性免疫球蛋白。它们具有高度纯度、特异性强、亲和力高等独特的结构特点。克隆抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链通过二硫键和非共价键结合而成。与多克隆抗体相比，克隆抗体具有单一的抗原识别区域和无限量重复的特性，从而能够更准确地识别和结合特定抗原。这使得克隆抗体在免疫学研究、临床诊断和疾病治疗等领域广受应用。克隆抗体的生产过程免疫动物利用特定的抗原刺激动物产生所需的多克隆抗体。细胞融合将免疫动物的B细胞和骨髓瘤细胞融合,产生杂交瘤细胞。细胞选择通过HAT培养基对杂交瘤细胞进行筛选和培养。产抗体细胞克隆化从杂交瘤细胞群中分离出单一克隆细胞株,保证产抗体的单克隆性。产抗体测定通过ELISA等测定方法对杂交瘤细胞株的抗体进行分析和选择。大规模培养与纯化选择优秀的杂交瘤细胞株,大规模培养并对所产抗体进行纯化提取。杂交瘤细胞技术的发现11.杂交瘤细胞技术的诞生1975年，凯赞和米尔斯提出了制造单克隆抗体的杂交瘤细胞技术。这项突破性发明为抗体工程开辟了全新的道路。22.抗原刺激与B细胞融合该技术通过将特异性B细胞与骨髓瘤细胞融合,产生能持续分泌抗体的杂交细胞系。33.单克隆抗体的产生杂交瘤细胞能无限期地生产单一特异性的单克隆抗体,而不是多种多样的多克隆抗体。44.技术的重要意义杂交瘤细胞技术的发明为免疫学研究和临床应用开辟了广阔的前景,成为生物医药工业的重要支柱。杂交瘤细胞技术的原理1抗体形成过程当机体感染病原体时,B细胞会受到刺激产生抗体,通过与抗原结合中和或清除病原体。2杂交瘤细胞的制备将B细胞与骨髓瘤细胞融合,形成能持续分泌单一抗体的杂交瘤细胞。3抗体生产与纯化杂交瘤细胞可以大量培养,并可分离纯化产生的单克隆抗体。杂交瘤细胞的选择与培养1细胞培养基选择特定的培养基以满足杂交瘤细胞的生长需求2细胞株选择选择合适的骨髓瘤细胞株作为融合对象3细胞融合通过化学试剂或电脉冲促进B细胞与骨髓瘤细胞的融合4抗体分泌筛选筛选出高效分泌目标抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞的培养是制备单克隆抗体的关键步骤。首先需要选择合适的培养基和细胞株,然后通过化学或电刺激促进B细胞与骨髓瘤细胞的融合。最后,需要对融合细胞进行抗体分泌能力的筛选,以挑选出高效产抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体的分离纯化1细胞培养在培养基中大规模培养杂交瘤细胞2细胞收获收集培养上清液中含有的单克隆抗体3亲和层析利用蛋白A或蛋白G亲和层析分离纯化4制剂处理进行缓冲液交换、浓缩等制剂制备单克隆抗体的分离纯化是一个多步骤的过程。首先通过大规模培养杂交瘤细胞,收集培养上清液中含有的单克隆抗体。然后利用蛋白A或蛋白G亲和层析技术进行分离纯化,最后进行缓冲液交换、浓缩等制剂处理,得到纯度高、稳定性好的单克隆抗体制剂。单克隆抗体的特点高度特异性单克隆抗体可以针对特定的抗原表位进行识别和结合，具有极高的特异性。单一性单克隆抗体是由单一类型的B细胞克隆产生的，具有高度的均一性和纯度。稳定性单克隆抗体的生产过程可以大规模、持续地生产,具备良好的稳定性和可重复性。来源可控单克隆抗体的制备来源可以人工控制和调节,不受动物免疫等因素的影响。单克隆抗体的应用领域免疫诊断单克隆抗体在流式细胞术、酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫组化等免疫检测技术中广泛应用,用于疾病诊断和病原体检测。药物靶向治疗单克隆抗体可以特异性地识别和结合肿瘤细胞上的特异性抗原,发挥靶向杀伤作用,在肿瘤治疗中发挥重要作用。免疫治疗单克隆抗体可以增强或抑制机体免疫功能,在自身免疫性疾病、过敏性疾病、移植排斥反应等方面具有重要应用。单克隆抗体在免疫学研究中的应用细胞表面标记单克隆抗体可用于识别和定量特定的细胞表面分子,在免疫细胞分类和细胞功能分析中广泛应用。细胞因子检测单克隆抗体可用于检测和测量细胞分泌的各种细胞因子,有助于研究免疫调节机制。蛋白质纯化单克隆抗体可用于免疫亲和层析纯化特定的蛋白质,为免疫学研究提供高纯度的目标分子。单克隆抗体在临床诊断中的应用疾病诊断单克隆抗体可用于检测疾病特