一个中国Gilbert综合征家系的UGT1A1基因诊断 .pdf

一个中国Gilbert综合征家系的UGT1A1基因诊断

孙健;尹丹;毛君;陈瑛

【摘要】目的对一个中国汉族Gilbert综合征的遗传家系UGT1A1基因突变位

点进行检测,以明确该家系的致病原因.方法采集先证者及其家系成员共两位的外

周血,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶

(UGT1A1)基因的5个外显子以及启动子,以琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物,纯化后

直接测序鉴定.结果先证者及其姨UGT1A1基因启动子存在TA插入突变,为杂合

突变,其姨还存在Gly7lArg杂合突变.结论该Gilbert综合征患者家系UGT1A1基

因存在TA插入突变和Gly7lArg两种突变方式.

【期刊名称】《山西医科大学学报》

【年(卷),期】2014(045)009

【总页数】4页(P869-872)

【关键词】Gilbert综合征;UGT1A1;基因突变;家系

【作者】孙健;尹丹;毛君;陈瑛

【作者单位】南京医科大学附属苏州医院产科,苏州215002;南京医科大学附属苏

州医院产科,苏州215002;南京医科大学附属苏州医院产科,苏州215002;南京医科

大学附属苏州医院新生儿科

【正文语种】中文

【中图分类】R596

Gilbert综合征(Gilbertsyndrome)是血液中非结合胆红素显著增高而发生黄疸的

一类良性遗传性疾病［1］。正常人的胆红素经单核-巨噬细胞系统产生后与白蛋

白结合，转运到肝细胞表面后被肝细胞摄取、内化固定并转运到肝微粒体，在胆红

素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGTA1)作用下，一个或两个葡萄糖醛酸基结合

到胆红素分子侧链上，生成两种结合胆红素，即胆红素单葡萄糖醛酸酯和胆红素二

葡萄糖醛酸酯，并排泌到胆道系统中［2］。

胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A1)是肝脏结合胆红素的关键酶，在催

化和排泄胆红素过程中具有至关重要的作用，UGT1A1基因异常可导致肝脏微粒

体的胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶表达下降，从而引起胆红素代谢障碍。国

外报道UGT1A1基因有很多突变型，在高加索人和非洲人中，在UGT1A1的启动

子TATA盒中一般有TA插入，使正常A(TA)6TAA突变为A(TA)7TAA［3］，在

亚洲人中，变异更多发生在编码区，该变异有的为纯合性，而有的为杂合性。因此

该疾病的遗传特征是常染色体隐性遗传还是常染色体显性遗传还存在争议［4，

5］。国外报道其发病率为3%-10%［6］。本研究对1例Gilbert综合征患者及

其家系进行致病基因突变位点检测，明确该家系的发病机制。

1对象和方法

1.1样本来源

先证者(Ⅲ1)，女，28岁，体检发现总胆红素升高至49.1μmol/L，直接胆红素和

间接胆红素都偏高，谷草转氨酶、谷丙转氨酶等肝功能指标正常，查肝、胆、胰、

脾B超未见异常，查血常规示血红蛋白122g/L，其余血常规指标基本正常，查

网织红细胞示0.0598，基本排除血液科溶血性疾病。

家系调查(见图1):家族4代，共4人有症状，先证者(Ⅲ1);先证者外公(Ⅰ1)有皮肤

巩膜黄染，但是外公拒绝抽血化验血生化全套;先证者之姨(Ⅱ5)也有皮肤巩膜黄染

情况，总胆红素偏高;先证者之女(Ⅳ1)出生第2天溶血性黄疸，总胆红素严重偏高，

2周岁总胆红素仍偏高。根据流行病调查结果排除其他疾病，调查前每位成员都做

到知情同意，并与所有采血对象签署知情同意书。

图1患者一家4代家系图Figure1ThepedigreeofGilbertsyndrome’s

family

1.2引物设计及合成

设计UGT1A1基因启动子区域TATA盒及5对外显子及侧翼部分内含子序列，用

于鉴定该家系UGT1A1基因突变情况，所设计的引物见表1，全部引物均由上海

捷瑞生物工程有限公司(Generay)生物技术有限公司合成，使用浓度均为1