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临床输血检验技术
HLA抗原检测技术
学习目标
1.熟悉HLA血清学分型试验的原理及质量控制。
2.淋巴细胞毒交叉配合试验的原理及质量控制。
3.HLA分子生物学分型方法
HLA血清学分型试验
+补体
台盼蓝染液
抗原与抗体结合
当特异性抗体与待检淋巴细胞表面HLA分子结合后，激活补体，使细胞膜通透性增加或细胞死亡，加入染料后在显微镜下可见结合补体的细胞被活性染料着色。
分离淋巴细胞
HLA血清学分型试验
微量淋巴细胞毒试验
HLA血清学分型试验
质量控制
HLA抗原抗体
最好选用单克隆抗血清
抗体效价适宜
存在剂量效应
淋巴细胞
要求活性和纯度高
浓度为2～4×106/mL
病理状态下HLA可能会表达异常
孵育温度和时间
严格掌握孵育时间
最适温度为20-25℃
HLA血清学分型试验
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