病理学研究中常用的分子生物学基本技术与其应用.ppt

病理学研究中常用的分子生物学基本技术与其应用

分子病理学基本概念现代分子生物学vs传统病理学疾病发生过程中分子事件及其与疾病发生的关系揭示根本机制2021/1/52

复习有关的分子生物学概念(1)核酸的结构与功能核酸---多核苷酸。核酸由核苷酸组成核苷酸由碱基、核糖/脱氧核糖和磷酸构成碱基有五种：A腺嘌呤T胸腺嘧啶U尿嘧啶G鸟嘌呤C胞嘧啶核苷酸连接方式核酸----DNA（脱氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）2021/1/53

DNA和RNA的差别从结构上看DNA：含脱氧核糖及胸腺嘧啶ACGTRNA：含核糖及尿嘧啶ACGU从功能上看DNA：构成染色体内的基因组、细胞器基因组，是遗传信息的贮存和携带者RNA：包括mRNA(信使RNA),rRNA(核糖体RNA),tRNA(转移RNA)，分别进行转录、转译的功能2021/1/54

DNA结构一级结构即DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序碱基顺序就代表了核苷酸顺序。又称为核苷酸序列或碱基序列二级结构即DNA分子的双螺旋结构这种双螺旋结构的一个重要特征是：在一定条件下，双链可解开，亦可重新形成双链三级结构DNA超螺旋结构2021/1/55

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DNA复制双链解链各自为模板合成新的互补链DNA转录以DNA为模板合成RNA过程DNA翻译蛋白质合成的同义词以遗传密码破读的手段转变为蛋白质的氨基酸排列顺序2021/1/57

如GGC——甘氨酸GTC——颉氨酸遗传信息贮存于DNA，在核内通过转录成mRNA，在胞浆内mRNA作直接模板来指导翻译(2)基因(gene)基因表达是指基因的转录翻译以及它们的调控转录在胞核内进行，翻译在胞浆中进行(3)染色质(chromatin)主要成分是DNA和蛋白质，细胞间期,光镜下呈细颗粒状染色体（chromatosome）主要成分同上，细胞分裂期，由染色质浓集而成，呈杆状,有恒定数目2021/1/58

同一物质在不同时期的形态变化(4)蛋白质一级结构多肽链氨基酸排列顺序序列改变→构型改变→功能改变二级结构局部/某一段肽链空间位置三级结构(三维结构）整条肽链空间位置四级结构多条肽链位置2021/1/59

真核生物基因组单复制顺序（singlecopysequence）在整个DNA分子中只出现一次或少数几次中等重复顺序(moderatelyrepetitivesequences)在DNA分子中重复出现几十到几千次高重复顺序(highlytepetitivesequence)在DNA分子中重复几百万次反转重复顺序(invertedrepetitivesequerce)其特点是一段碱基呈回文结构回文结构（palindromicstructure）又称发夹结构(hairpinstructure)2021/1/510

如：5’AAGCTAGCTT3’3’TTCGATCGAA5’其中一条单链回折又可形成双链3’TTCGA∣∣∣∣∣5’AAGCT2021/1/511

内含子与外显子内含子（intron）或插入顺序外显子（exon）DNA变性定义变性后性质变性条件DNA复性（renaturation）退火2021/1/512

影响复性因素简单分子快于复杂分子小分子快于大分子DNA浓度高快于浓度低离子强度高（盐浓度高）快于离子强度低cDNAmR