高三生物一轮复习课件动物细胞工程.pptx

2.3基因工程的应用第十单元生物技术与工程10.4-动物细胞工程

考点一动物细胞培养

考点一动物细胞培养1.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2.原理：3.培养对象：胚胎或幼龄动物的细胞（原因：）细胞增殖（有丝分裂）应用：①人造皮肤的构建；②动物分泌蛋白的规模化生产；③用于药理及细胞发育方面的研究。分化程度低，增殖能力强，更易于培养4.目的：获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。

糖类、氨基酸、无机盐、维生素…将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分一般用液体培养基，也称为培养液4.培养的条件：考点一动物细胞培养

糖类、氨基酸、无机盐、维生素…①培养液、培养用具：灭菌处理；②无菌操作；③适量添加抗生素定期更换培养液，以便清除代谢物。①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为；③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。36.5±0.5℃7.2-7.4无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境

糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境维持培养液的pH95%空气+5%CO2的CO2培养箱O2：细胞代谢所必需CO2培养箱松盖培养瓶培养皿培养仪器

取动物组织（动物胚胎或幼龄动物）用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理单个细胞加培养液细胞悬液原代培养在培养皿或培养瓶中传代培养分瓶5.动物细胞培养的过程判断依据：是否分瓶！①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。②传代培养：分瓶后的细胞培养。考点一动物细胞培养

取动物组织（动物胚胎或幼龄动物）用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理单个细胞加培养液细胞悬液原代培养在培养皿或培养瓶中传代培养分瓶5.动物细胞培养的过程（1）培养前为什么分散成单个细胞？①成块组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长与增殖。②利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。考点一动物细胞培养

取动物组织（动物胚胎或幼龄动物）用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理单个细胞加培养液细胞悬液原代培养在培养皿或培养瓶中传代培养分瓶5.动物细胞培养的过程（2）取动物组织时，胰蛋白酶有什么作用？可以换成胃蛋白酶吗？理由。将动物组织细胞间的蛋白质成分酶解，使细胞分散开，获得单个细胞。不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶没有活性。(3)在用胰蛋白酶处理时间是否越久越好？细胞膜含有蛋白质，长时间处理会损伤细胞，要控制好时间。考点一动物细胞培养

取动物组织（动物胚胎或幼龄动物）用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理单个细胞加培养液细胞悬液原代培养在培养皿或培养瓶中传代培养分瓶5.动物细胞培养的过程(4)原代培养到一定程度后，为什么要分瓶进行传代培养？（结合教材44页）考点一动物细胞培养

①悬浮生长细胞：②贴壁生长细胞：体外培养的动物细胞类型：【教材44页】注：贴壁生长细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上（细胞贴壁）。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖（接触抑制）。贴壁生长与接触抑制圆球形细胞刚开始铺展贴壁生长（100×）培养的动物细胞贴壁生长并进行有丝分裂（100×）细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×）细胞能够悬浮在培养液中生长増殖。细胞需要贴附于某些基质（如培养瓶壁）表面才能增殖（主要类型）。

形成一层细胞可形成多层细胞根据癌细胞的特点，思考一下培养的癌细胞有没有接触抑制现象？癌细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞的黏着性降低，在适宜的条件下可以无限增殖，因此培养的癌细胞无接触抑制现象，在培养瓶中能够生长成多层。【拓展思考】

取动物组织（动物胚胎或幼龄动物）用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理单个细胞加培养液细胞悬液原代培养在培养皿或培养瓶中传代培养分瓶5.动物细胞培养的过程(5)进行传代培养时，怎样收集贴壁生长的细胞和悬浮培养的细胞？（结合教材44-45页）传代培养贴壁生长的细胞:②制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞加培养液用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，再用离心法收集悬浮培养的细胞:考点一动物细胞培养直接用