探讨N-乙酰半胱氨酸对急性肺损伤大鼠的保护作用.doc

探讨N-乙酰半胱氨酸对急性肺损伤大鼠的保护作用

摘要：目的：探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对油酸(OA)诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠的保护作用。方法：成年雄性SD大鼠18只，随机分成对照组、损伤组（ALI组）和N-乙酰半胱氨酸组（NAC组），后两组在注射OA后3h检测肺湿重与肺干重比（W/D），肺组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及肺组织病理检查。结果：ALI组MPO、MDA明显升高，SOD明显降低，与对照组比较有明显差异（P关键词：?急性肺损伤N-乙酰半胱氨酸氧自由基过氧化物酶类超氧化物歧化酶丙二醛

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急性肺损伤（AcuteLungInjury,ALI）是由脓毒血症、创伤和休克等多种病因引起的全身炎症反应综合症（systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS）在肺部的表现，病死率34％～60％。目前国内外对ALI的药物干预研究较多，但临床研究结果均未能取得满意的疗效。N-乙酰半胱氨酸（Nacetylcysteine，NAC）是一种经典的祛痰药，不仅具有溶解黏液作用，而且具有较强抗氧化、抗炎作用。本文以ALI大鼠模型为研究对象，观察NAC对ALI的影响及其作用机制，旨在为ALI的药物治疗提供依据。

1?材料和方法

?实验动物及主要器材

成年雄性SD大鼠18只，体重200～250g，购于贵阳医学院实验动物中心。油酸（OA）购自广东西陇化工厂（批号0107131），组织髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）试剂盒购于南京建成生物工程研究所，NAC试剂盒购自美国Sigma公司。

?ALI动物模型的复制

实验大鼠以3%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔麻醉，固定于手术台，ALI组（n=6）大鼠尾静脉缓慢注射OAml/kg，NAC组（n=6）除注射OA前3d每天给大鼠腹腔注射NAC150mg/kg外，其余同ALI组；对照组（n=6）尾静脉注射生理盐水ml/kg。

?肺干重、肺湿重测定

经颈动脉快速放血处死大鼠，立即开胸取左肺称湿重后，置于70℃烤箱内24h完全脱水后称干重，计算肺湿重与干重比值。

?MPO、SOD、MDA测定

取右中上肺组织制成10％肺组织匀浆，3000r/min离心10min，取上清-20℃保存待测。肺组织匀浆MPO、SOD、MDA测定严格按照南京建成生物工程研究所提供的试剂操作说明书进行。

?肺病理组织学染色

取右下肺组织，置入10%中性福尔马林中固定后，石腊包埋，HE染色。病理形态学积分方法根据肺间质水肿、肺泡水肿、炎细胞浸润、透明膜形成、肺不张改变等指标,按“无、轻、中、重”程度分别计“0、1、2、3分”,然后累计总分。

?统计学处理

用SPSS统计软件包进行数据统计处理，结果用x±s表示。两样本间比较用t检验，多组样本间比较用方差分析，P有统计学意义。

2?结果

大鼠肺组织PaO2、肺湿重与干重比值及病理积分见表1，大鼠肺组织MPO、SOD及MDA水平见表2。ALI组肺组织MPO与病理积分成正相关r=，P。表1?各组大鼠PaO2、肺湿重与肺干重比值、病理积分（略）注：W/D代表肺湿重与干重比值;(1)与对照组比较，P；(2)与ALI组比较，P。表2?各组大鼠MPO、SOD、MDA、水平（略）注：(1)与对照组比较,P，(2)与ALI组比较，P。

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大鼠肺组织肉眼观：对照组大鼠肺呈均匀淡粉红色,包膜光滑,弹性好,表面未见病损灶,切面均质,无液体溢出。ALI组大鼠肺表面呈暗红色,可见肺包膜下普遍充血水肿,弹性降低,肺体积增大显著，切面可见粉红色泡沫状液体。NAC组大鼠肺表面呈暗红色,肺包膜下充血水肿轻,肺体积较ALI组减小。光镜下对照组大鼠肺组织结构完整,肺泡腔清晰,肺泡隔无水肿、炎症等改变。ALI组大鼠光镜下可见明显肺泡和肺间质水肿、炎细胞浸润、透明膜形成、肺不张。NAC组大鼠光镜下肺泡和肺间质水肿、炎细胞浸润等改变较轻。

3?讨论

ALI是由非心源性的各种严重肺内、外致病因素等多种原发疾病引起急性进行性加重的呼吸困难和难治性低氧血症。目前认为，各种病因引发过度的炎症反应，不受控制发展为SIRS，继续进展则为多器官功能障碍综合征（multipleorgandysfunctionsyndrome,MODS），肺脏是这一病理进程中首位易受损伤的器官，ALI/ARDS是MODS在肺部的表现。本实验显示，各组大鼠注射OA后呼吸增快，伴有呼