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《食品用菌种检验副干酪乳酪杆菌检验PMA-qPCR法

（征求意见稿）》编制说明

一、工作简况

（一）背景

食品用菌种是我国食品工业发展的重要战略性生物资源，在各类食品中被广

泛应用。针对单一和复合菌种产品，开展菌种精准鉴定和活菌定量检测，是保障

产品质量和实现生产过程一致性控制的重要技术手段。2024年4月，中国食品

科学技术学会正式发布《食品用菌种检验鼠李糖乳酪杆菌检验PMA-qPCR法》

团体标准，于2024年4月1日正式实施。该标准为首个将PMA-qPCR技术应用

于食品用菌种活菌定量检测的标准方法，为益生菌活菌靶向定量检测标准提供了

技术参考。为进一步拓展PMA-qPCR方法的行业应用，本项目持续深入研究该

技术在其他食品用菌种的鉴定和活菌定量方面的可行性。

副干酪乳酪杆菌（Lacticaseibacillusparacasei）作为目前研究和应用最为广

泛的乳杆菌之一，是我国《可用于食品的菌种名单》、欧盟QPS名单和美国GRAS

名单收录菌种，具有长期安全使用历史。本标准以副干酪乳酪杆菌为研究对象，

通过系统方法学验证，建立了副干酪乳酪杆菌的PMA-qPCR检测标准方法，可

同时实现食品中副干酪乳酪杆菌的精准鉴定和活菌计数，为满足食品用菌种检测

需求、提高监管效能、保障消费者权益提供技术支撑。

（二）主要起草过程

项目任务来自《中国食品科学技术学会关于发布2024年团体标准立项计划

（第一批）的通知》（中食学字〔2024〕第001号），项目编号为ttbz-2024-001。

2023年7月，起草组在充分整理研究数据、收集国内外相关法律法规的基础上，

制定了详细的工作计划。2023年11月至2024年5月，组织开展了方法建立、

方法验证研究，形成团体标准初稿。2024年6月，组织召开专家研讨会，与会专

家一致认为标准建立和方法验证过程设计合理、数据详实、科学可行，可满足食

品用副干酪乳酪杆菌活菌定量检测要求，建议完善实验室间比对、方法适用性等

验证数据，进一步规范标准文本、完善技术参数。2024年6月至2024年9月，

组织开展三家实验室的方法验证比对、方法适用性研究，根据专家意见，完善形

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成标准征求意见稿。

二、国内外相关法规标准情况

在我国，已发布的《益生菌类保健食品申报与审评规定（试行）》、GB7718-

2011《食品安全国家标准预包装食品标签通则》、GB7101-2022《食品安全国家

标准饮料》、GB31639-2023《食品安全国家标准食品加工用菌种制剂》、QB/T

4575-2013《食品加工用乳酸菌》、T/CIFST009-2022《食品用益生菌通则》，以及

正在制修订的《食品用菌种安全性评价程序（征求意见稿）》等均对食品用菌种

的鉴定、活菌总数提出了明确要求，活菌计数推荐方法均为平板计数法。2024年

4月，中国食品科技学会发布T/CIFST020-2024《食品用菌种检验鼠李糖乳酪

杆菌检验PMA-qPCR法》团体标准，首次将PMA-qPCR技术应用于食品用菌种

活菌定量检测标准方法，但目前未见适用于副干酪乳酪杆菌的PMA-qPCR检测

方法。

国际上，WHO/FAO《食品益生菌评价指南》和IDFNo.513/2021《益生菌菌

株水平鉴定指导文件》推荐采用PFGE、RAPD、WGS、特异性PCR等技术对益

生菌进行鉴定。美国《食品化学法典FCC12》推荐采用特异性PCR引物对食品

用菌种开展鉴定。ISO7889|IDF117:2003《酸奶中特征微生物的计数37℃菌落

计数法》、ISO29981|IDF220:2010《乳制品双歧杆菌的计数37℃条件下的菌落

计数法》等系列标准均推荐采用平板计数法对食品中乳酸菌进行活菌计数，目前

国际上未见PMA-qPCR技术应用在食品用菌种的活菌定量检测方面的相关标准

发布。

三、标准主要技术内容

（一）方法建立

构建副干酪乳酪杆菌全基因组数据库，开展泛基因组分析，挖掘副干酪乳酪

杆菌