《种子的扩大培养》.pdfVIP

第五节种子的扩大培养

整理课件

一、种子扩大培养的任务

n菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序，又

称之为种子制备〔培养〕。

n种子培养seedculture〕：是指将冷冻枯燥

管、沙土管中处于休眠状态的工业菌种接入试

管斜面活化后，再经过摇瓶及种子罐逐级扩大

培养而获得一定数量和质量的纯种的过程。这

种纯培养物称为种子。

整理课件

n优良种子应具备的条件：

q菌种细胞的生长活力强，转种至发酵罐后能迅速生

长，延滞期短。

q菌种生理状态稳定，如菌丝形态、菌丝生长速率和

种子培养液的特性等符合要求。

q菌体浓度及总量能满足大容量发酵罐接种量的要求。

q无杂菌污染，保证纯种发酵。

q菌种适应性强，能保持稳定的生产能力。

整理课件

二、种子制备的过程

n从工业发酵的角度来说，种子制备分成两个

阶段：

①实验室种子制备：斜面、固体培养基扩大培养或

摇瓶液体培养

②生产车间种子制备：种子罐扩大培养

整理课件

1、实验室的种子制备

n菌种活化

n对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快

的菌种可以采用固体培养基培养孢子，孢子可

直接作为种子罐的种子，这样操作简便，不易

污染杂菌。

n对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种，可

以用液体培养法。

整理课件

〔1〕放线菌孢子的制备

a)放线菌的孢子培养一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含

有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白

胨和一些无机盐等。

b)碳源和氮源不要太丰富〔碳源约为1％，氮源不超过0.5％

〕，枯燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。

c)放线菌斜面的培养温度大多数为28℃，少数为37℃，培养

时间为5～14天。

整理课件

菌种接入种子罐有两种方法：

n孢子进罐法——将斜面孢子制成孢子悬浮液直

接接入种子罐，可减少批与批之间的差异，具

有操作方便、工艺过程简单、便于控制孢子质

量等优点；

n摇瓶菌丝进罐法——适用于某些生长发育缓慢

的放线菌，可以缩短种子在种子罐内的培养时

间。

整理课件

放线菌发酵生产的工艺过程：

③

①

菌种母斜面（孢子）子斜面（孢子）摇瓶种子（菌丝）种子罐发酵罐

②

④

①制备母斜面孢子、子斜面孢子、摇瓶种子，菌丝接入种子罐

②制备母斜面孢子、摇瓶种子，菌丝接入种子罐

③制备母斜面孢子、子斜面孢子，孢子接入种子罐

④制备母斜面孢子，孢子接入种子罐

整理课件

〔2〕霉菌孢子的制备

n霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸

皮、麦粒等天然农产品为培养基。

n霉菌的培养一般为25～28℃，

n培养时间为4～14天。

整理课件

〔3〕细菌培养物的制备

n细菌的斜面培养基多采用碳源限量而氮源丰富的

配方，牛肉膏、蛋白胨常用作有机氮源。

n细菌培养基温度大多数为37℃，少数为28℃，

n细菌菌体培养时间一般为1～2天，产芽孢的细

菌需培养5～10天。

整理课件

2、生产车间种子的制备

〔1〕摇瓶种子制备

n某些孢子发芽和菌丝繁殖速度缓慢的菌种，需将

孢子经摇瓶培养成菌丝后再进入种子罐，这就是