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3306无菌检验或纯粹检验法--第1页
1抽样应随机抽样并注意代表性。
1.1制造疫苗用的各种原菌液、毒液和其他配苗组织乳剂、稳定剂及半成品的无菌或
纯粹检验,应每瓶(罐)分别抽样进行,抽样量为2~10ml。
1.2成品的无菌检验或纯粹检验应按每批或每个亚批进行,每批按瓶数的百分之一抽
样,但不应少于5瓶,最多不超过10瓶,每瓶分别进行检验。
2检验用培养基
2.1无菌检验
2.1.1培养基及配方
硫乙醇酸盐流体培养基(FluidThioglycollateMedium,简称TG)用于厌氧菌的检查,
同时也可以用于检查需氧菌。酪胨琼脂培养基(PeptonefromcaseinAgarMedium,简称GA)
用于检查需氧菌。胰酪大豆胨液体培养基(TrypticaseSoyBroth,简称TSB;亦称大豆酪蛋
白消化物培养基Soybean-CaseinDigestMedium)用于真菌和需氧菌的检查。
2.1.1.1硫乙醇酸盐流体培养基
胰酪蛋白胨15g
酵母浸出粉5.0g
无水葡萄糖5.0g
硫乙醇酸钠0.5g
(或硫乙醇酸)(或0.3ml)
L-半胱氨酸盐酸盐(或L-胱氨酸)0.5g
氯化钠2.5g
新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml
琼脂0.75g
纯化水加至1000ml
(灭菌后pH值为6.9~7.3)
除葡萄糖和0.1%青溶液外,将上述成分混合,加热溶解,然后加入葡萄糖和0.1%
青溶液,摇匀,将加热的培养基放至室温,用1.0mol/L氢氧化钠溶液调整pH值,使
灭菌后的培养基pH值为6.9~7.3,分装,116℃灭菌30分钟。若培养基氧化层(粉红色)
的高度超过培养基深度的1/3,需用水浴或自由流动的蒸汽加热驱氧,至粉红色消失后,迅
速冷却,只限加热1次,并防止污染。
2.1.1.2酪胨琼脂培养基
胰酪蛋白胨15g
酵母浸出粉5.0g
无水葡萄糖5.0g
L-半胱氨酸盐酸盐(或L-胱氨酸)0.5g
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