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T/ZJSIAXXXXX—2024
番茄主要病害抗性鉴定与评价技术规程
第4部分:番茄叶霉病抗性鉴定与评价技术规程
1范围
本文件规定了番茄对叶霉病抗性鉴定评价的规范性引用文件、术语和定义、接种体制备、鉴定番茄苗培育、鉴定方法、病情调查、结果统计和结果评价。
本文件适用于所有种类的番茄,包括番茄属(LycopersiconMiller.)下2个亚群和9个种,以及栽培品种、育种种质资源和品系等番茄对叶霉病的抗性鉴定与抗性评价。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB16715瓜菜作物种子第3部分:茄果类NY/T2118蔬菜育苗基质
3术语和定义
下列术语和定义适用于本规程。3.1
抗病性diseaseresistance
植物所具有的能够克服或减轻病原物致病作用的可遗传性状。3.2
抗性评价resistanceevaluation
根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。3.3
致病性pathogenicity
病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。3.4
病情级别diseaserating
人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。3.5
病原分离物pathogenisolate
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T/ZJSIAXXXXX—2024
采用人工方法从植物发病部位分离获得的、在特定环境条件下培养的病原物。3.6
接种体inoculum
用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。3.7
接种液inoculumsuspension
用于接种的、含有接种体的悬浮液。3.8
发病率rateofinfected
发病番茄植株数占总番茄植株数的百分率。3.9
病情指数diseaseindex(DI)
通过对植物个体发病程度(病情级别)数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述形式,是描述发病严重度的综合指标。
4接种体制备
4.1基本设备
无菌室、恒温箱培箱、恒温振荡箱培养、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温的温室(温度保持在20℃~30℃)、塑料盆、铝锅、电炉、培养皿、试管、剪刀、镊子、广口瓶、酒精灯、滤纸、三角瓶、各种培养基等。
4.2接种体分离
番茄叶霉病菌以PDA培养基,采用常规组织分离法,从番茄叶霉病的发病植株的发病部位,分离病原物。分离物经形态学和分子生物学鉴定,以及致病性测定,确认为番茄叶霉病菌[Fulviafulva(Cooke)Ciferri],见附录B。
4.3接种体确定
分别选择分布较广、致病力较强的番茄叶霉病菌的优势菌株作为人工接种鉴定使用的接种体。
4.4接种体保存
4.4.1短期保存
将番茄叶霉病菌分别接种于PDA斜面养基上,在22℃~24℃培养15d后,置4℃冰箱中保存。
4.4.2长期保存
将番茄叶霉病菌分别接种于PDA平板培养基上,并在接种点周围放置一定数量的灭菌滤纸片,在22℃~24℃培养15d后,取出滤纸片,经真空干燥后于-20℃~-80℃的低温冰箱中保存。
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T/ZJSIAXXXXX—2024
4.5接种体悬浮液制备
将保存在PDA培养基上的叶霉病菌,在无菌操作下,移植于PDA平板培养基上,置于22℃~24℃培养15d~20d产孢,再向每个平皿内加入无菌蒸馏水至淹没菌面,用玻棒洗下分生孢子,连续两次收集孢子囊悬浮液,得到接种体悬浮液,待用。
5鉴定番茄苗培育
5.1种子质量
应符合GB16715的要求。
5.2浸种催芽
将待鉴定番茄的种子经5%次氯酸钠溶液浸种10min,用清水冲洗3次,再用清水浸泡5h后,置于28℃温箱中保湿催芽。
5.3播种
露白发芽后播植于温室,采用营养钵盆栽法进行育苗,基质应符合NY/T2118的要求。将蔬菜育苗基质装入新的直径11cm~13cm、高10cm~13cm的塑料营养钵中,至2/3高度,排列整齐,播种前先用自来水浇透育苗基质,随后将已催芽的待鉴定番茄种子播于上述塑料营养钵中,每钵1粒种子,然后用泥炭育苗基质覆盖,以盖住种子为宜。重复3次,每重复30钵,共90钵,待用。
5.4对照品种
抗病性鉴定时,鉴定中设置一个感病对照品种,感病对照不得缺省。感病对照宜选用本地区的常规感病品种,感病对照品种选择标准为在常规接菌量下病情指数大于50的品种。鉴定中也可增设一个抗病对照品种,抗病对照品种也可缺省,选用本地区的常规抗病品种。抗病对照品种选择标准为在常规接菌量下病情指数小于15
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