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第二章细胞工程
第二节动物细胞工程
一、动物细胞培养
1.动物细胞培养知识:
(1)概念:从动物体中相关的,将它,然后在下,让这些细胞和的技术。
(2)原理:
(3)地位:
(4)关键操作:和。
2.(一)动物细胞培养的条件
营养
(1)成分
①已知成分
将细胞所需的(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按其和严格配制而成的培养基,称为_。
②未知成分
使用合成培养基时,通常需加入等一些天然成分。
(2)培养基的物理性质:培养动物细胞一般使用,也称为。
3.无菌、无毒的环境:①对和进行处理;②在下进行操作;③还需要。
4.温度、pH和渗透压
(1)适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以为宜。
(2)适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为。
(3)适宜的渗透压:维持适宜渗透压的目的。
5.气体环境
(1)组成:动物细胞培养所需气体主要有和??。
(2)气体作用:①O2:;②CO2:。
6.(二)动物细胞培养的过程
(1)原代培养:将的细胞培养,即动物组织经处理后的称为原代培养。
(2)传代培养:将_的细胞培养称为传代培养;
(3)细胞贴壁:体外培养的细胞需要才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的_上,这种现象称为细胞贴壁;
(4)接触抑制:当_细胞生长到_时,细胞通常会。
7.取动物组织
(1)取材:或的组织、器官。
(2)取材原因:。
8.制成细胞悬液
(1)制成细胞悬液的步骤:①;②
(2)将组织分散成单个细胞的原因:①从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞,彼此;②。
(3)将组织分散成单个细胞的方法:①;②。
9.原代培养:将放入内
10.分瓶、传代培养
悬浮生长类:;贴壁生长类:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集;将收集的细胞制成,分瓶培养。
11.植物组织培养与动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
理论基础
细胞增殖
区
别
培养基
类型
固体或半固体培养基
培养基
成分
水、矿质元素、维生素、植物激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等
葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、等
取材
离体植物器官、组织、细胞
动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织
关键环节
细胞的脱分化和再分化
细胞增殖和癌变
结果
新的组织或植株个体,可以体现全能性
新的细胞系或细胞株,不形成个体,不体现全能性
应用
①植株快速繁殖;②脱毒植株的培育;
③人工种子;④生产药物、杀虫剂等;
⑤转基因植物的培育
①蛋白质生物制品的生产;②皮肤移植材料的培育;③检测有毒物质;④生理、病理、药理等方面的研究
相同点
两种技术手段培养过程中细胞都进行分裂,都是繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂;②均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
(三)干细胞培养及其应用
12.干细胞分布:存在于、和等多种组织和器官中。
13.分类:
(1)干细胞包括和等
(2)胚胎干细胞(简称)
①分布:存在于中
②特点:。
(3)成体干细胞
①分布:存在于中
②类别:包括中的、中的、中的等。
③特点:。
14.干细胞的应用
(1)原理:干细胞有着能力及_潜能的干细胞,与的_等密切相关。
(2)应用:
造血干细胞:。
神经干细胞:(如帕金森病、阿尔茨海默病等)。
诱导多能干细胞(iPS细胞):。
二、动物细胞融合与单克隆抗体技术
15.(一)动物细胞融合技术
(1)概念:使_或动物细胞结合形成细胞的技术。
(2)结果:形成的具有。
(3)原理:。
(4)意义:。
(5)诱导融合的常用方法:和。
(6)融合实质及完成的标志:。
(7)应用:
①细胞融合技术已经成为研究、_和等的重要手段。
②利用动物细胞融合技术发展起来的,为开辟了新途径。
16.动物细胞融合和植物体细胞杂交比较
项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜具有;植物细胞的
细胞膜具有一定的流动性
细胞融合前的处理方法
用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞
诱导细胞融合的方法
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