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紫外-可见分光光度法

§18.1紫外—可见吸光光度法概论利用被测物质的分子对紫外-可见光具有选择性吸收的特性而建立的分析方法称为紫外－可见吸光光度法。１.紫外－可见吸光光度法的特点（1）具有较高的灵敏度。（2）有一定的准确度，该方法相对误差为2%-5%可满足对微量组分测定的要求。（3）操作简便、快速、选择性好、仪器设备简单。（4）应用广泛

2.物质对光的选择性吸收?/nm颜色互补光400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-760红蓝绿不同颜色的可见光波长及其互补光

2.物质对光的选择性吸收吸收曲线：以入射光的波长λ为横坐标，相应的吸光度A为纵坐标作图，得到的吸光度随波长变化的曲线，又称为吸收光谱。KMnO4的吸收曲线

?/nm700300400500600350525545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光谱350对不同物质的溶液，其最大吸收波长不同，此特性可作为物质定性分析的依据。2.物质对光的选择性吸收

3.物质对光吸收的本质价电子绕着分子轨道高速旋转分子绕着其重心的转动原子在平衡位置附近的振动分子内部的运动（分子的电子能级的能量）（分子振动能级的能量）（分子转动能级的能量）

T－透光率（透射比）（Transmittance）A=lg(I0/It)=lg(1/T)=-lgT=kbc§18.2光的吸收定律—朗伯-比耳定律ItI0bdxs（Lambert-Beer）

当c的单位用g·L-1表示时A＝kbck吸光系数 k的单位:L·g-1·cm-1k的单位:L·mol-1·cm-1当c的单位用mol·L-1表示时k－摩尔吸光系数A＝kbc

§1.3偏离比耳定律的原因01234mg/mlA。。。。*0.80.60.40.20工作曲线1.比耳定律的局限性比耳定律假设了吸收粒子之间是无相互作用的，因此仅在稀溶液的情况下才适用。

§18.3偏离比耳定律的原因比耳定律仅在入射光为单色光时才是正确的。现假定入射光由l1和l2两种波长组成，溶液吸光物质服从比耳定律的。则2.非单色入射光引起的偏离测定时，总的入射光强为I01+I02，透过光强为I1+I2，则

§18.3偏离比耳定律的原因3.化学误差引起的偏离由于被测物质在溶液中发生缔合、解离或溶剂化、互变异构、配合物的逐级形成等化学原因，造成对比耳定律的偏离。在一个非缓冲体系的铬酸盐溶液中存在着如下的平衡：测定时，在大部分波长处，Cr2O72-的k值与CrO42-的k值是很不相同的。A与c不成线性关系。

分光光度计的基本组成部件：读数指示器光源单色器吸收池检测系统§18.4紫外—可见吸光光度计

分光光度法（紫外-可见分光光度法）UV-vis0.575I0参比样品入射光I0透射光It请注意与定义比较未考虑吸收池和溶剂对光子的作用

吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池检测器：利用光电效应，将光能转换成电流讯号。 光电池，光电管指示器： 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录

光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm)。M1M2出射狭缝光屏透镜平面透射光栅光栅衍射示意图原理：利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光.

检测器SeAu，Ag半导体h?硒光电池Ag、Au

721型分光光度计

§18.5显色反应及其条件显色反应：将被测组分转变成有色化合物的化学反应。显色剂：能与被测组分反应使之生成有色化合物的试剂。

1、显色剂的用量显色条件的选择吸光度与显色剂用量的关系

溶液的酸度对显色反应的影响：2、溶液的酸度（2）对显色剂的平衡浓度和颜色的影响（3）对有色化合物组成的影响不同的显色反应的适宜pH是通过实验确定的。（1）对被测组分存在状态的影响

pH与吸光度的关系曲线

3、显色温度通过实验找出各自的最佳温度范围。4、显色时间通过实验来确定合适的测定时间。5、溶剂：有机溶剂降低有色化合物的解离度，提高显色反应的灵敏度。

§18.6仪器测量误差和测量