动物生理学实验设计.pdf

动物生理学实验设计--第1页

动物实验设计

姓名：

学号：

班级：

指导老师：

二O一二年十二月

动物生理学实验设计--第1页

动物生理学实验设计--第2页

乙酰胆碱对鲫鱼离体肠平滑肌的作用

一、前言

在生理学实验中，通过学生自主设计实验项目，收集资料完成实验并以论

文格式完成实验报告，有利于学生及时掌握生理学实验的基本内容，旨在培养和

提高学生观察、分析、综合、独立思考和解决问题的思维能力。促胃肠动力药包

括很多种类,这类药物有着不同受体类型和化学结构以及作用机制,对从食管

到结肠的胃肠道的不同部位有着不同程度的促动力作用.这类药物对胃肠道作用

机制的研究包括:胆碱能机制、肾上腺能机制、抗多巴胺和抗胆碱脂酶机制、神

经体液机制等。本实验重在探索通过离体器官实验，建立方法研究药物对M胆碱

受体的激动作用和竞争性拮抗作用。M胆碱受体激活剂乙酰胆碱能剂量依赖性地

激动肠管平滑肌上的M胆碱胆碱受体，产生平滑肌收缩效应，M胆碱受体抑制剂

阿托品可竞争性拮抗乙酰胆碱对M胆碱受体的激动作用。

二、研究内容

1、通过向离体小肠滴加不同浓度乙酰胆碱和阿托品观察小肠平滑肌的收缩曲线

变化

2、通过生物信号采集系统对鲫鱼收缩曲线进行记录

三、研究对象

鲫鱼，鲤形目、鲤科、鲫属，是一种主要以植物为食的杂食性鱼，喜群集而行，

择食而居。鲫鱼分布广泛，全国各地水域常年均有生产，以2～4月份和8～12

月份的鲫鱼最肥美，为我国重要食用鱼类之一。

四、实验药品及设备

1、试剂和药品：乙酰胆碱（mol/L）：1:32000、1:16000、1:8000、1:4000、

1:2000、1：1000

阿托品（mol/L）：3*10-7

Jaeger：氯化钠6.0g、氯化钾0.12g、氯化钙0.14g、碳酸氢钠0.2g、磷酸二氢

钠0.01、葡萄糖2.0g、蒸馏水加至1000ml、pH7.2

2.装置和器材：恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集系统、万能支架、加液

器、纱布、张力换能器、鱼类手术器械一套。

五、实验方法与步骤

1．离体肠肌的制备

猛击鲫鱼头部至昏，立即剖开腹腔，自幽门下5cm剪取空肠和回肠上段，迅

速置于Jaeger液中。小心剪去肠系膜，用吸管吸取Jaeger液缓慢冲洗肠内容物；

动物生理学实验设计--第2页

动物生理学实验设计--第3页

将空肠段分割成2cm的小段备用，用棉线结扎肠断两端，作为固定肠肌之用。

2．实验装置

将制成的标本一端一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连接于肌

力换能器的应变片上并与生物信号采集系统的刺激器输出相连，浴池内放20ml

Jaeger液。适当调节换能器的高度，使其与标本间的松紧度合适。将肠段完全

浸浴在调好温度的浴槽中，并调整好Jaeger充气量(小气泡接连不断)。

3.开启计算机采集系统

接通与张力传感器相连的通道，固定L管并调节扎线与张力传感器，使肠段运动

自如又能牵动传感器(注意：扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增益与扫描速度，

使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。

4．实验观察

（1