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检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质
实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。斐林试剂水浴加热(50—65℃)还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)生产砖红色沉淀斐林试剂:甲液:0.1g/ml的NaOH乙液:0.05g/ml的CuSO4
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染液染成红色。脂肪颗粒苏丹Ⅳ橘黄色的脂肪颗粒显微镜观察脂肪颗粒苏丹Ⅲ显微镜观察红色的脂肪颗粒
1、还原糖的检测:选材(白色或近白色材料)制备组织样液(制浆、过滤、取液)取2ml待测组织样液加入1ml斐林试剂砖红色沉淀50—65℃水浴2min颜色变化:棕色沉淀砖红色沉淀(Cu2O)蓝色沉淀(Cu(OH)2)注意:斐林试剂要现用现配,要将甲液和乙液混合均匀后再使用
注意事项:结论:可溶性还原糖与斐林试剂在水浴加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。1、选择可溶性还原糖含量高、组织颜色较浅或近白色的组织材料。2、斐林试剂要现用现配,并进行水浴加热。
2、脂肪的检测选材切片制片镜检(选取切片、染色、去浮色、制临时装片)染色:滴2-3滴苏丹Ⅲ,染色3min;或苏丹Ⅳ,染色1min。去浮色:滴1-2滴50%的酒精溶液结论:圆形小颗粒呈橘黄色(或红色)
注意事项:1、实验材料最好是富含脂肪的种子,比如花生种子。2、花生种子必须提前浸泡3h—4h。3、染色的时间不宜过长。4、染色后,一定要用50%的酒精洗去浮色。
注意事项:1、实验材料最好选择富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋。2、如果选择大豆,必须提前浸泡1h-2h,这样容易研磨;如果选择鸡蛋清,要注意稀释,否则实验后鸡蛋清易黏附在试管壁,使反应不彻底,试管也不易清洗。
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