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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1961.12—2013
出口食品过敏原成分检测第12部分:实时荧光PCR方法检测芝麻成分
Detectionofallergencomponentsinfoodforexport—
Part12:RealtimePCRmethodfordetectingsesamecomponents
2013-03-01发布2013-09-16实施
国家质量监督检验检疫总局中华人民共和国发布
国家质量监督检验检疫总局
I
SN/T1961.12—2013
前言
SN/T1961《出口食品过敏原成分检测》共分为19部分:——第1部分:酶联免疫法检测花生成分;
——第2部分:实时荧光PCR法检测花生成分;
——第3部分:酶联免疫吸附法检测荞麦蛋白成分;——第4部分:实时荧光PCR方法检测腰果成分;
——第5部分:实时荧光PCR方法检测开心果成分; 第6部分:实时荧光PCR方法检测胡桃成分;
第7部分:实时荧光PCR方法检测胡萝卜成分; 第8部分:实时荧光PCR方法检测榛果成分;
——第9部分:实时荧光PCR方法检测杏仁成分;
第10部分:实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分; 第11部分:实时荧光PCR方法检测麸质成分; 第12部分:实时荧光PCR方法检测芝麻成分; 第13部分:实时荧光PCR方法检测小麦成分;——第14部分:实时荧光PCR方法检测鱼成分;
——第15部分:实时荧光PCR方法检测芹菜成分; 第16部分:实时荧光PCR方法检测芥末成分; 第17部分:实时荧光PCR方法检测羽扇豆成分; 第18部分:实时荧光PCR方法检测荞麦成分;——第19部分:实时荧光PCR方法检测大豆成分。
本部分为SN/T1961的第12部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、深圳大学。本部分主要起草人:陈颖、蒋丹、曹际娟、麻丽丹、郑秋月、刘志刚、吉坤美、吴序栎。
1
SN/T1961.12—2013
出口食品过敏原成分检测第12部分:实时荧光PCR方法检测芝麻成分
1范围
SN/T1961的本部分规定了食品中过敏原芝麻成分的实时荧光PCR法检测方法。本部分适用于食品及其原料中过敏原芝麻成分的定性检测。
本部分所规定方法的最低检出限(LOD)为0.01%(质量分数)。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
过敏原allergen
又称致敏原或变应原,是指能够引起变态反应的抗原。
3.2
芝麻sesame
别名:胡麻、白麻,属胡麻科(Pedaliacaue)胡麻属(SsbamumLim)。
3.3
实时荧光PCRrealtimePCR
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。
3.4
Ct值cyclethreshold
每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。
4方法提要
样品经研磨后,提取DNA,以DNA为模板,采用芝麻管家基因2SalbuminmRNA设计特异性检测引物和探针进行实时荧光PCR扩增,根据Ct值,判断样品中是否存在过敏原芝麻成分。
5试剂和材料
除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂。实验用水应符合GB/T6682中一级水的规格。所有试
2
SN/T1961.12—2013
剂均用无DNA酶污染的容器分装。
5.1芝麻成分扩增引物和探针、内参照(真核生物成分)引物和探针详见表1。
表1试验用引物和探针
名称
序列(5-3)
目的基因
内参照5’端引物
内参照3’端引物
内参照探针
TCTGCCCTATCAACTTTCGATGG
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