代谢组学技术及其在中药研究中的应用.ppt

雄黄、朱砂国家标准中收载含朱砂、雄黄的中成药占收载的全部的中成方制剂的6.34%应用广泛，历史悠久有效和有毒的双重性安全性倍受关注Wei等采用代谢组学的方法对雄黄、朱砂的毒性进行了研究：雄性Wistar大鼠灌胃给药；采集尿液；1HNMR对代谢物进行分析；生物标志物的分析；LaiWei,PeiqiuLiao,etalToxicologyandAppliedPharmacology234(2009)314–325结果表明:尿液中，三羧酸循环中间产物柠檬酸盐(citrate)、琥珀酸盐(succinate)、2．酮戊二酸盐(2-ketoglutarate)显著增加；乙酸乙酯、牛磺酸(taurine)、丙酮显著增加，并伴随着二甲基甘氨酸(dimethylglycine)、丙酮酸(pylllvate)和肠道菌产物苯乙尿酸(phenylacetylglycine)、马尿酸盐(hippurate)等内源性代谢产物的减少，且这些内源性代谢产物的变化呈现时间和剂量依赖性。二甲基甘氨酸为肾乳头的毒性标志物，丙酮为肾脏皮层S3段的毒性标志物。牛磺酸为肝脏受损的指标．上述代谢产物分析表明，对肝肾具有一定的毒性．Schematicrepresentationoftheenergymetabolicnetwork.Schematicrepresentationofthedegradationpathwayofcholine朱砂主要成分为HgS，雄黄主要成分为As2S2朱砂、雄黄在人体内的毒性程度与以下因素相关：（1）在体内产生的可溶性砷、汞量（2）上述可溶性的砷、汞在体内的存在价态砷的不同价态及其毒性：砷化氢（AsH3）＞亚砷酸(AsⅢ)和砷酸(AsⅤ)＞甲基砷酸(ＭＭＡ)和二甲基砷酸(ＤＭＡ)胂甜菜碱(ＡｓＢ)和胂胆碱(ＡｓＣ)基本无毒汞的不同价态及其毒性：甲基汞＞乙基汞＞Hg2+＞Hg＋有研究表明，含朱砂、雄黄的中药制剂经口服后，其所含的砷或汞基本不被人体吸收。实验表明：在粪便中所检测到的总砷、总汞，分别占给药量的99％和98.5％因此仅以砷、汞元素的总量作为判断其是否安全是不科学的研究雄黄中砷、朱砂中汞在体内可溶性部分的含量及其可溶性的砷、汞在体内的存在价态，合理评价该类药物，保证含朱砂、雄黄中成药的安全性和有效性复方黄黛片的主要成分四硫化四砷—雄黄靛玉红———青黛丹参酮II-A--丹参四硫化四砷Tetraarsenictetrasulfide靛玉红Indirubin丹参酮II-A治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的现代中药配方制剂本课题组关于代谢组学的实验研究基于代谢组学的天麻川芎药对配伍研究研究背景---天麻川芎成分：酚类，甾醇类、有机酸、氨基酸类药理作用：镇静、镇痛、抗惊厥成分：挥发油、生物碱、酚性物质、苯酞内酯药理作用：镇静、镇痛、抗凝血天麻川芎研究背景---天麻川芎药对配伍依据：疾病特点药性及药效作用：减少药物毒性增强药效偏头痛多属于内伤类头痛，常和“风”有关天麻川芎药对恰合偏头痛的病机天麻能祛风湿以止痛、平肝熄风以止痉川芎具有活血、行气、祛风、止痛的功效研究背景---天麻川芎药对药对是古代医家应用在中药复方中的一种特殊形式，是中药复方的最小单位，其配伍的规律及作用机制是现代中药研究的热点之一。天麻和川芎常作为药对使用，是历代医家用于治疗偏头痛、眩晕的经典药对组合，不过不同时期各大医家对其配伍比例却不尽相同，用法也各异在《本草纲目》等古代本草书籍中，记载的天麻川芎用量之比最常见的比例为1:4和4:1，其中天麻川芎用量之比1:4最为常见研究内容药材分组：天麻组川芎组天麻川芎A组（天麻：川芎=1:4）天麻川芎B组（天麻：川芎=4:1）提取方法：10倍量70%乙醇提取时间1h提取3次一、天麻川芎不同配伍比例对有效成分提取的影响---天麻川芎不同配伍比例对有效成分提取的影响流动相：甲醇-水(50:50)检测波长：280nm；柱温：25℃；流速：0.8mL.min-1川芎嗪的含量测定---天麻川芎不同配伍比例对有效成分提取的影响川芎嗪含量测定结果组别每克川芎含川芎嗪（mg）平均值（mg）川芎嗪提取增加率（%）川芎组0.0730.0760.0740.074天麻川芎A组0.0970.0950.09528.27%0.092天麻川芎B组0.083