绝对好课件基因工程课件演示文稿.pptx

绝对好课件基因工程课件演示文稿;（优选）绝对好课件基因工程课件;第3页，共67页。;第一节基因工程的原理;转黄瓜抗青枯病基因的甜椒;不会引起过敏的转基因大豆;转基因

鲑鱼;乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷);;;概念：

按照人们的意愿，将一种生物的基因在体外剪切，并与特殊的运载工具进行重新组合，然后转入另一种生物的体内进行扩增，并使之表达产生所需蛋白质的技术。

意义：

能够打破生物种属的界限，在分子水平上定向改造生物的遗传特性。;1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

来源：大肠杆菌等微生物

.特点：

识别特异的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键。

结果：

产生粘性末端;限制性内切酶作用过程;

提醒①切割的化学键为磷酸二酯键。

②在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶,

目的是产生相同的黏性末端。

③将一个基因从DNA分子上切割下来,需要2个限制

酶,同时产生4个黏性末端。

④不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末

端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶产生的

黏性末端不相同。;.连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。

;DNA连接酶的作用过程;常用类型;3.运载工具——载体“分子运输车”

(1)类型

提醒①质粒本质是DNA,不是细胞器;②特点:小

型环状。

(2)功能：将目的基因导入受体细胞。

(3)应具备条件

①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制；

②有一个至多个限制酶的切割位点,以便于与外源

基因连接；

③有特殊的遗传标记基因,供重组DNA的检测和鉴定。;第19页，共67页。;第20页，共67页。;1.基因工程的操作步骤正确的操作顺序是

①使目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞

③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求

④提取目的基因

A．③②④① B．②④①③

C．④①②③ D．③④①②;二、基因工程的操作程序;目的基因主要是指___________________;1、直接分离法——鸟枪法;获取目的基因的方法;利用PCR（聚合酶链式反应）扩增;引物(primer)：在DNA复制时，DNA聚合酶不能从头开始复制，必须有一小段单链DNA或RNA，作为每个多核苷酸链延伸的出发点。;;利用PCR技术扩增目的基因;以上过程都可以在自动化控制的PCR扩增仪内进行，非常方便快速。;;目的基因的mRNA;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？;二、重组载体的构建——核心;科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。

起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。

然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果长成的植株，有了抗虫能力。;思考：根据刚才的资料，基因表达载体应该由哪些部分组成？;;①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构

②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键

③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少

④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。;重组载体的转化和筛选;;显微注射法：将基因表达载体提纯，用显微仪注射到受

精卵中;;

筛选：

利用载体上的标记基因，借助选择培养基进行筛选。;提醒①唯一不涉及到碱基互补配对的操作步骤。

②微生物做受体细胞主要是个体微小,代谢旺盛,

繁殖速度快,获得目的基因产物多。

③植物细胞还可用基因枪法和花粉管通道法。

;对位训练

4.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是（）

A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶

和载体

B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸

序列

C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌

繁殖快

D.只要目的基因进入受体细胞就能实现表达;;例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表