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隐球菌抗原快速检测的临床应用;;第一章节;隐球菌为圆形菌体,外周有宽厚的荚膜,有的荚膜较菌体还大,折光性强。但无菌丝。
隐球菌属已知有37个不同的种,但具致病性的多为新型隐球菌,其特点是菌体由一层很厚的多糖荚膜所包被。
新型隐球菌主要包括新生变种、格特变种等。;美国感染病学会的“隐球菌病治疗临床实践指南(2010年更新)”中指出,隐球菌病的易感人群主要包括:;第二章节;随着AIDS患者的增多,各种机会性感染的发病率也随之上升,新型隐球菌成为继白色念珠菌之后最常见的机会性感染真菌,其在HIV中的感染率已达8.5%。
隐球菌性脑膜炎发生率和死亡率在发达国家达到10-30%,在发展中国家可达到50-100%。
早期隐球菌感染临床表现缺乏特异性,脑脊液变化不典型,但是当发展为隐球菌性脑膜炎时,死亡率可达到20%。
新型隐球菌感染可发生于全身多个部位,最常见的感染主要发生在中枢神经系统、肺部、皮肤等。
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皮肤黏膜隐球菌病-皮肤科
10%~15%的隐球菌病患者出现皮肤损害,比如出现丘疹、水疱、脓疱、传染性软疣样丘疹、痤疮样脓疱等症状。
儿童脑膜炎-儿科
儿童由于免疫系统不健全,也容易被隐球菌感染,一般儿童的脑脊液样本都会做隐球菌筛查
免疫缺陷人群-感染科、器官移植科、ICU等
新型隐球菌作为一种机会性感染真菌,主要侵犯免疫缺陷人群,如器官移植患者以及AIDS患者及使用免疫抑制剂人群等。
肺隐球菌病-呼吸科
须与结核感染相鉴别。
;隐球菌孢子通过空气传播,进入呼吸道,当机体抵抗力下降时发生感染吸入孢子沉积于肺部,侵入宿主24h后形成荚膜多糖,从而获得致病力。;在撒哈拉以南的非洲地区,隐球菌脑膜炎是造成艾滋患者死亡的一种重要疾病,隐球菌抗原可以在病症发生的几周前被检测到。
隐球菌抗原的检测对于隐球菌脑膜炎的预防有非常积极的作用。;荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物,是隐球菌感染确诊的依据。
在感染的初期,荚膜多糖抗原就被检测到,因此是隐球菌病早期诊断的标志物。
随着病情的发展,荚膜多糖抗原的含量会随之发生变化,还可作为病情监测的指标。;第三章节;墨汁染色(菌体)
真菌培养(活菌)
ELISA(荚膜多糖抗原)
乳胶凝集法(荚膜多糖抗原)
胶体金法(荚膜多糖抗原);1.墨汁染色:
是诊断隐球菌脑膜炎最简便快速的方法,但敏感性差,阳性检出率很低。
2.脑脊液或血液培养(金标准):
阳性检出率低,培养(2-10天)及鉴定时间长,易误诊。
3.抗原检测试验:
脑脊液和血清样本抗原检测的敏感性可达到97%和87%*,能实现早期快速诊断,但费用高。;隐球菌荚膜多糖抗原GXM(Glucuronoxylomannan,GXM):;收录指南;隐球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)原理(美国IMMY公司);无需样本预处理
10分钟得到结果
定性或半定量测定
结果客观
血清,脑脊液,血浆;样本收集及制备;简单5步,10分钟得到结果;检测结果判读;质量控制;胶体金法和培养/墨汁染色对比
;胶体金法和乳胶凝集法对比;;隐球菌抗原分布;联合检测的意义;;2017年(1月-8月)与2018年(1月-8月)
隐球菌抗原快速检测送检标本阳性率;2017年(1月-8月)与2018年(1月-8月)
隐球菌抗原快速检测阳性数与临床确诊的比较;四、病例分享;现病史;2018年5月7日外院胸部CT
;血常规:WBC7.49×109/L,N79.7%;RBC4.42×1012/L,Hb125g/L;PLT251×109/L
大小便常规正常。
肝功能、电解质、心肌酶、血糖、DDR、凝血常规、CRP、IgE均正常
肾功能:UA388.3μmol/L;血脂:CHOL5.73mmol/L,TG4.57mmol/L
血沉11mm/h;TSPOT阴性;PPD皮试阴性;结核抗体阴性;肺炎支原体抗体阴性;糖化血红蛋白6.1%
肿瘤相关标记物CYFRA21、AFP、CEA、CA125、Fer、NSE、SCCA均正常。
痰普培阴性;痰真菌培养阴性;痰AFB阴性。
经皮肺穿刺针吸活检:涂片见纤毛柱状上皮细胞、淋巴细胞、吞噬细胞及中性粒细胞,未发现癌细胞。;结核科在完善上述检查后考虑继发性肺结核可能性大,予以左氧氟沙星抗感染,并于5月16日起予以HREZ诊断性抗痨治疗及护肝等治疗后,患者于5月22日出院。
出院后患者继续坚持抗痨治疗,仍间断有咳嗽、咳痰,较前无明显改善。入院前4天受凉后出现咳嗽加重,并痰中带血,午后低热,体温最高37.8℃,伴盗汗。
;血常规:WBC13.1×109/L,N85.4%;RBC4.29×1012/L,Hb12
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