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α-淀粉酶的生产工艺;α-淀粉酶〔α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖苷酶)多是胞外酶,其作用于淀粉时可从分子内部随机地切开淀粉链的α-1,4糖苷键,而生成糊精和复原糖,产物的末端残基碳原子构型为α-构型,故称α-淀粉酶;α-淀粉酶的背景知识;α-淀粉酶的生产工艺中以玉米粉为碳源,以豆饼为氮源,以BF-7658枯草芽孢杆菌为生产菌种,采用深层发酵法生产工业粗酶。;菌种的选育及制备;α-淀粉酶培养基的制作;
种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体,并使菌丝体长得粗壮成为活力强的种子。对于种子培养基的营养要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也比较高些,浓度以稀薄为好,可以到达较高的溶解氧,供大量菌体生长和繁殖。
α-淀粉酶的种子培养基的配置:将豆饼1%、蛋白胨和酵母膏各0.4%、氯化钠0.05%配置成种子培养基(pH7.1~7.2),在0.1MPa蒸汽灭菌20min。;发酵培养基的要求是营养要适当丰富和完全适合于菌种的生理特性和要求,使菌种迅速生长、健壮,能在比较短的周期内充分发挥产生菌合成发酵产物的能力,但要注意本钱和能耗。
α-淀粉酶的发酵培养基配方是:麸皮70%、小米糠20%、木薯粉10%、烧碱0.5%,加水使水量达60%,常压蒸汽灭菌1h。;孢子斜面
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孢子悬浮液
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种子罐
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发酵罐
补料罐;发酵过程的工艺控制;4〕溶氧的控制
α-淀粉酶发酵是需氧发酵,无论是基质的氧化,菌体的生长还是产物的合成均需大量的氧气。假设发酵液中氧气缺乏,可通过加大通气量,适当降低温度,提高罐压,补水,提高搅拌速度来控制。
5〕染菌的控制
严格无菌操作,种子灭菌要彻底,净化空气设备,操作要慎重,设备灭菌要彻底。假设在前期染菌,应重新灭菌;中期染菌,应偏离杂菌生长条件;后期染菌,可提前或及时放罐。;种子扩大培养;3〕发酵罐培养
培养基的配制:用麦芽糖液配置成含麦芽糖6%、豆粕水解液6%~7%、Na2HPO4·12H2O0.8%、(NH4)2SO40.4%、CaCl20.2%、NH4Cl0.15%、豆油1kg、深井水20L,调pH至6.5~7.0。
发酵罐培养基经消毒灭菌冷却后接入3%~5%种子培养成熟液。培养条件为:温度37±1℃,罐压0.5kg/cm2,风量1~20h为1:0.48vvm,20h后1:0.67vvm,培养时间为28~36h。;下游加工处理;1〕发酵液的过滤和预处理;2〕提取;3〕纯化;谢谢
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