培养基配制技术—培养基的制备.pptxVIP

培养基的概念

培养基是指人工配制并灭菌的，适合微生物生长繁殖或生产代谢产物的，用于微生物培养、分离、鉴别、研究和保存的混合营养基质。因此，培养基必须具备微生物所需要的碳、氮、磷、硫等大量元素及微量元素、生长因子及水等，保持一定的参透压，维持适合pH值，呈现适当的物理和无菌状态。

;培养基分类：;按物理状态划分

（1）液体培养基用各种材料的抽提物或化学试剂按照一定比例配成的水溶液或液体状态的营养基质叫液体培养基，微生物在液体培养基中静止生长时，需氧微生物往往可在液面形成膜、岛、环，而液体仍清晰透明；厌氧或兼性厌氧微生物生长而导致液体混浊或有沉淀。

（2）固体培养基除了用固体物料加水或营养盐构成的疏松固体培养基（如曲、固体酶制剂、酱）外，固体培养基主要是指在液体培养基中加入一定量的固化胶体物质而配制成的胨状培养基。将微生物细胞接种到固体培养基上培养，能形成一定特征的菌落或菌苔。固体培养基对于研究微生物的分离、纯化、培养、保存、鉴定等均是不可缺少的。

;按用途划分

（1）.基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。基础培养基也可以作为一些特殊培养基的基础成分，再根据某种微生物的特殊营养需求，在基础培养基中加入所需营养物质而制成特殊培养基。牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基。

（2）富集培养基也称营养培养基，在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基，这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。富集培养基常用于营养要求苛刻的异养微生物的培养。

（3）鉴别培养基在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来。

（4）选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。根据不同种类微生物的特殊营养需???或对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。;配制培养基的基本原则

一、根据微生物的营养特点选择营养物质

微生物营养类型不同对营养物质的需求不同，因此依据不同微生物的营养要求配制适宜的培养基是配制培养基的基本原则之一。

自养型微生物能从简单的无机物合成自身的有机体，因此培养自养型微生物的培养基可以由简单的无机物组成。例如氧化硫硫杆菌培养基组成中，只有CO2、(NH4)2SO4、MgSO4、FeSO4、KH2PO4、CaCL2、S和水等无机物，没有加入任何有机化合物。多数藻类也是自养型微生物，它们的培养基组成也比较简单，只需要无机营养物质而不需要有机营养物质。但是培养异养型微生物的培养基需要添加无机物和有机物，而且不同类型的异养型微生物的营养要求差异很大。如培养大肠杆菌的培养基组成简单，而培养肠膜明串珠菌的培养基成分非常复杂，仅生长因子多达33种。原生动物也是异养型微生物，需要较多的营养物质，如梨形四膜虫的培养基含有10种氨基酸、7种维生素、鸟嘌呤、尿嘧啶及一些无机盐等。;二、控制营养物质的浓度和比例

营养物质浓度过低不能满足微生物正常生长所需，太高则可能对微生物产生毒害，如高浓度的无机盐、重金属离子等会抑菌或杀菌。因此，营养物质合适的浓度是微生物生长发育的必要条件之一。在生产过程中，在不影响微生物的生理特性和代谢转化率的情况下，通常趋向在较高浓度下进行生产，以提高产物产量，并尽可能选育高渗透压的生产菌株。当然，培养基浓度太大会使培养基黏度增加和溶氧量降低。

营养物质之间应有适当的比例，尤其培养基中营养物质的碳氮比(C／N)在微生物培养中尤其重要。不同菌种、不同发酵产物所要求的碳氮比是不同的。菌体在不同生长阶段，对其碳氮比的要求也不一样。氮源过多，则菌体繁殖旺盛，pH值偏高，不利于代谢产物的积累；氮源不足，则菌体繁殖量少，从而影响产量。碳源过多，则容易形成较低的pH值；碳源不足，菌体衰老和自溶。;三、控制酸碱度

各种微生物正常生长均有合适的pH值，一般霉菌和酵母菌比较适于微酸性环境，放线菌和细菌适于中性或微碱性环境。为此，当培养基配制好后，若pH值不合适，必须加以调节。

四、控制氧化还原电位

不同微生物对氧化还原电位的要求不同，一般地，好氧型微生物氧化还原电位值大于+0.1V，最适值是+0.3～+0.4V，厌氧型微生物氧化还原电位值小于+0.1V。氧化还原电位的高低受氧气分压、pH值和微生物代谢产物的影响。通常增加通气量或加入氧化剂，可以增加氧化还原电位值，加入还原剂如抗坏血酸、硫化氢、