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考点二探究影响酶活性的条件

必备知识·夯实基础

知|识|巩|固

1.探究温度对酶活性的影响

(1)实验原理

温度影响酶的活性,从而影响淀粉的水解,滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。

(2)实验步骤、现象及结论

取6支试管,分别编号为1与1′、2与2′、3与3′,并分别进行以下操作。

试管

编号

1

1′

2

2′

3

3′

实验步骤

2mL淀粉酶溶液

2mL可溶性淀粉溶液

2mL淀粉酶溶液

2mL可溶性淀粉溶液

2mL淀粉酶溶液

2mL可溶性淀粉溶液

在冰水中水浴5min

在60℃温水中水浴5min

在沸水中水浴5min

1与1′试管内液体混合,摇匀

2与2′试管内液体混合,摇匀

3与3′试管内液体混合,摇匀

在冰水中水浴数分钟

在60℃温水中水浴相同时间

在沸水中水浴相同时间

取出试管,分别滴加2滴碘液,摇匀,观察现象

实验

现象

呈蓝色

无蓝色出现

呈蓝色

结论

酶发挥催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性

提醒:①探究温度对酶活性的影响时,一定要让反应物和酶在各自所需的温度下保温一段时间,再进行混合。

②选择淀粉和淀粉酶来探究酶的最适温度时,检测试剂不可用斐林试剂代替碘液。因为斐林试剂需在水浴加热条件下才会发生特定的颜色反应,而该实验中需严格控制温度。

③探究温度对酶活性的影响时,不宜用H2O2作反应物,因为H2O2易分解,加热条件下其分解会加快,氧气的产生速率增加,并不能准确反映酶活性的变化。

2.探究pH对酶活性的影响

(1)实验原理:2H2O2eq\o(―――――→,\s\up7(过氧化氢酶))2H2O+O2。pH影响酶的活性,从而影响氧气的生成速率,也可用带火星的卫生香燃烧的情况来检验O2的生成速率。

(2)步骤

实验

步骤

实验操

作内容

试管1

试管2

试管3

注入等量过氧化氢酶溶液

2滴

2滴

2滴

注入不同pH的溶液

1mL

蒸馏水

1mL

盐酸

1mL

NaOH溶液

注入等量的过氧化氢溶液

2mL

2mL

2mL

观察现象

有大量气泡产生

基本无气泡产生

基本无气泡产生

(3)结论:酶的催化作用需要适宜的pH,pH偏低或偏高都会影响酶的活性。

提醒:①探究pH对酶活性的影响时,必须先调pH,然后再将反应物与酶混合,否则反应物会在未调节好pH的情况下就在酶的作用下发生反应,影响实验的准确性。另外,本实验中也可将过氧化氢酶溶液和过氧化氢溶液分别调至同一pH再混合,以保证反应开始便达到预设pH。

②探究pH对酶活性的影响时,不能用斐林试剂作指示剂,因为盐酸会和斐林试剂发生反应,使斐林试剂失去作用。

思|维|辨|析

易错整合,判断正误。

(1)唾液淀粉酶催化反应最适温度和保存温度是37℃。(×)

(2)低温能降低酶活性的原因是其破坏了酶的空间结构。(×)

延|伸|探|究

1.在探究温度对酶活性的影响实验中,底物和酶溶液应在何时进行混合?

提示:先分别在预设的温度中保温一段时间后再混合,保证反应从一开始就是预设的温度。

2.在探究pH对酶活性的影响实验中,宜先保证酶的最适温度(排除温度干扰),且将酶溶液的pH调至实验要求的pH后再让反应物与酶接触,不宜在未达到预设pH前,让反应物与酶接触。

3.若选择淀粉和淀粉酶来探究温度对酶活性的影响,检测底物被分解的试剂宜选用碘液,不能选用斐林试剂的原因是什么?

提示:因为用斐林试剂鉴定时需要水浴加热,而该实验中需严格控制温度。

剖析难点·考点突破

精|准|命|题

考向一围绕教材基础实验,考查实验探究与分析能力

》例1(2022·浙江6月选考)下列关于研究淀粉酶的催化作用及特性实验的叙述,正确的是(B)

A.低温主要通过改变淀粉酶的氨基酸组成,导致酶变性失活

B.稀释100万倍的淀粉酶仍有催化能力,是因为酶的作用具高效性

C.淀粉酶在一定pH范围内起作用,酶活性随pH升高而不断升高

D.若在淀粉和淀粉酶混合液中加入蛋白酶,会加快淀粉的水解速率

解析:低温可以抑制酶的活性,不会改变淀粉酶的氨基酸组成,也不会导致酶变性失活,A错误;酶具有高效性,故稀释100万倍的淀粉酶仍有催化能力,B正确;酶活性的发挥需要适宜条件,在一定pH范围内,随着pH升高,酶活性升高,超过最适pH后,随pH增加,酶活性降低甚至失活,C错误;淀粉酶的本质是蛋白质,若在淀粉和淀粉酶混合液中加入蛋白酶,会将淀粉酶水解,则淀粉的水解速率会变慢,D错误。

〔变式训练〕

1.在“探究pH对过氧化氢酶活性的影响”的实验中,有学习小组对实验进行了改进,改进后的装置如图所示。下列叙述正确的是(B)

A.装置中①为H2O2溶液,②为过氧化氢酶,两者也可以对调

B.待过氧化氢酶与相应p

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